鉀是植物生長必需的營養(yǎng)元素,也是公認的煙草品質元素,但我國植煙土壤供鉀不足及煙株鉀素利用率低等問題,嚴重影響著我國煙葉鉀含量。由于北方植煙土壤主要以2:1型黏土礦物為主,干濕交替頻繁,土壤中鈣含量較高;而南方施用石灰改良土壤酸堿度,增加了土壤鈣含量,導致土壤中Ca2+、K+等交換性陽離子比例失調,煙草吸收鉀困難且煙葉鉀含量整體較低。因此研究鈣對煙草鉀吸收的影響,對提高煙葉鉀含量具有重要意義。植株鉀吸收與外界鈣濃度密切相關且關系十分復雜。有研究發(fā)現(xiàn),高鈣處理可以提高烤煙根系和煙葉的鉀含量,Ca2+可以防止細胞內K+外滲,減少根系陽離子流失,有利于K+的吸收。然而也有研究表明,土壤有效鈣含量與煙葉鉀含量呈負相關,鈣對鉀有一定的拮抗作用,Ca2+的存在會與K+競爭質膜上的吸收通道,減少植株對鉀的吸收。目前關于外界鈣濃度對煙草鉀吸收的影響研究,多集中在正常鉀水平下且兩者關系并不十分明確。因此本文以煙草品種K326為研究材料,采用室內水培的方法,通過對煙株進行兩種鉀水平和不同鈣濃度組合處理,探索低鉀脅迫下外界鈣濃度與煙草鉀吸收之間的關系,為鉀鈣平衡施肥提供依據(jù)。
供試材料為煙草品種K326,試驗于2019年在河南農(nóng)業(yè)大學煙草行業(yè)煙草栽培重點實驗室進行。煙草種子催芽后,移栽到裝有珍珠巖的小黑盆中,在光照培養(yǎng)箱內培養(yǎng),每日補充Hoagland完全營養(yǎng)液。培養(yǎng)條件如下:白天溫度(28+2)℃,夜間溫度(18+2)℃,每日照光14h,光強為4000lx,相對濕度為65%~70%。
當煙苗長至3片真葉時,挑選長勢一致的煙苗,于蒸餾水中饑餓處理24h,再分別置于不同鉀和鈣濃度的營養(yǎng)液中培養(yǎng)12d后,取煙株地上部及根系進行指標測定。試驗共設12個處理,包括2個鉀水平,分別為常鉀(5mmol/L)和低鉀(0.15mmol/L),以及6個鈣濃度(0、2、5、7、10、12mmol/L)。試驗所用營養(yǎng)液根據(jù)Hoagland完全營養(yǎng)溶液改良而成,去除營養(yǎng)液配方中所有鈣離子,使用氯化鈣調節(jié)營養(yǎng)液中鈣濃度,調節(jié)pH至6.5。7.0。在培養(yǎng)過程中,使用充氣泵每El通氣2h,每4d更換一次營養(yǎng)液,以保持營養(yǎng)液的成分相對穩(wěn)定。每處理6個重復。
分別取地上部及根系稱取鮮質量,105℃殺青15min,80℃烘干,分別測定地上部及根系干質量。
采用考馬斯亮藍G.250比色法測定葉片及根系中的可溶性蛋白含量;采用TTC(氯化三苯基四氮唑)法測定根系活力。葉片超氧化物歧化酶(SOD)活性測定采用核黃素-NBT法,過氧化物酶(POD)活性測定采用愈創(chuàng)木酚法,過氧化氫酶(CAT)活性測定采用紫外吸收法。
采用甲基百里香酚藍測定法定量檢測煙株根系中鈣離子含量,根據(jù)試劑盒使用步驟測定(試劑盒購自南京建成生物工程研究所)。
根系K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性根據(jù)試劑盒使用步驟測定(試劑盒購自南京建成生物工程研究所)。
樣品烘干研磨粉碎過0.2mm篩后,精確稱量0.1000g,采用Immol/L鹽酸提取,使用FP6400火焰光度計測定煙株地上部及根系鉀含量。
采用Excel2016進行數(shù)據(jù)整理及作圖,運用DPS7.05進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,使用Duncan新復極差法進行差異顯著性檢驗。
如圖1所示,常鉀水平下煙株地上部及根系的物質量均高于低鉀水平。兩種鉀水平下,隨著鈣濃度的升高,煙株地上部及根系的物質量均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,且均在鈣濃度為5mmol/L時達到最大值。鈣濃度為5mmol/L時,在同一鉀水平下地上部鮮質量與其他處理差異均達到顯著水平,地上部干質量與除鈣濃度為7mmol/L外的其他處理差異達到顯著水平。常鉀水平下的根系鮮質量和低鉀水平下的根系干質量在鈣濃度為5mmol/L時均與0、10、12mmol/L的處理差異達到顯著水平。低鉀水平下,鈣濃度為5mmol/L時的根系鮮質量與其他處理(除2mmol/L)差異達到顯著水平。
如圖2A所示,葉片可溶性蛋白含量在低鉀水平顯著高于常鉀水平(除鈣濃度0mmol/L);兩種鉀水平下均在鈣濃度為5mmol/L時最大,低鉀水平下較其他鈣濃度處理最大增加幅度為110.72%。根系可溶性蛋白(圖2B)在低鉀水平整體低于常鉀水平;常鉀水平隨著鈣濃度的升高呈現(xiàn)先增加后降低的單峰趨勢,鈣濃度為5mmol/L時最大;低鉀水平下,在鈣濃度為2和5mmol/L時較高,且與其他4個鈣濃度處理相比差異顯著。
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