摘 要：目的：建立高效液相色譜法同時(shí)快速測(cè)定四川豆瓣中5種食品添加劑安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉及脫氫乙酸的檢測(cè)方法。方法：樣品提取液使用 C18 色譜（250mm×4.6mm5μm）采用二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)；考察了檢測(cè)波長(zhǎng)、不同流動(dòng)相體系，不同流動(dòng)相比例、梯度洗脫及流動(dòng)相流速對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。結(jié)果：安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉及脫氫乙酸在 5.0 ～100.0µg/mL 范圍內(nèi)，濃度與峰面積有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于 0.99，樣品的加標(biāo)回收率分別為 81.2% ～ 92.2%、84.1%～ 96.8%、91.1% ～ 99.0%、85.1% ～ 92.3%、89.9% ～ 101.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于 3.00%。結(jié)論：本方法操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可適用于四川豆瓣中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸及安賽蜜含量的同時(shí)測(cè)定。

四川豆瓣是以蠶豆為原料，利用米曲霉等多種微生物共同發(fā)酵制成的調(diào)味品。四川豆瓣擁有悠久的歷史，已經(jīng)成為川式調(diào)味料的重要品種之一。在四川豆瓣生產(chǎn)過程中，為保持產(chǎn)品風(fēng)味、延長(zhǎng)貯存周期，廠家會(huì)添加一定量食品添加劑。食品添加劑是以少量添加于食品，以改善食品的外觀、風(fēng)味、組織結(jié)構(gòu)或貯存性質(zhì)的合成或者天然的非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。防腐劑（主要包括苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸）和人工合成甜味劑（主要包括糖精鈉和安賽蜜）是食品行業(yè)中被廣泛應(yīng)用的食品添加劑，且經(jīng)?；旌鲜褂?。長(zhǎng)期過量食用添加劑對(duì)人體有一定危害，GB 2760-2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)其使用范圍和相應(yīng)限量均有明確規(guī)定。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)報(bào)道的分析方法主要是針對(duì)這些添加劑中的一種或幾種，同時(shí)檢測(cè)四川豆瓣中上述五種食品添加劑的方法鮮見報(bào)道。本論文對(duì)四川豆瓣中的安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉及脫氫的同時(shí)檢測(cè)進(jìn)行了一系列的研究，考察了檢測(cè)波長(zhǎng)、不同流動(dòng)相體系、不同流動(dòng)相比例、梯度洗脫以及流動(dòng)相流速等檢測(cè)條件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，以期為豆瓣醬中五種添加劑的同時(shí)檢測(cè)提供更簡(jiǎn)便易行的方法。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

1.1.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.0mg/mL）、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.0mg/mL）、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.0mg/mL）、安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.0mg/mL）、脫氫乙酸（純度大于等于 98.0%），購(gòu)自德國(guó) Dr.Ehrenstotfer。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制

準(zhǔn)確稱取脫氫乙酸 10.000mg（準(zhǔn)確至0.001mg）用水溶解定容至 10mL，即脫氫乙酸儲(chǔ)備液濃度為 1.0mg/mL。

1.1.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制

分別準(zhǔn)確吸取五種添加劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.25mL、2.50mL、5.00mL 于 50mL 容量瓶中，用水稀釋并定容到刻度，即得五種添加劑濃度分別為 2.0µg/mL、5.0µg/mL、10.0µg/mL、25.0µg/mL、50.0µg/mL、100.0µg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.1.4 試劑

甲醇（色譜純，購(gòu)自美國(guó) Fisher 公司）；乙酸銨（色譜純，CNW）；磷酸二氫鉀（色譜純）；硫酸銨（色譜純）；試驗(yàn)用水為經(jīng) UP 凈化系統(tǒng)0.22µm 過濾膜過濾的純化水）。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1260 高效液相色譜儀系統(tǒng)（配有DAD 檢測(cè)器）；電子分析天平（TLE204/02）：瑞典梅特勒托利多公司；KQ-250E 超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18；柱：4.6 mm×150mm，5µm；進(jìn)樣量：20µL。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜和脫氫乙酸均易溶于水，因此本次實(shí)驗(yàn)選擇純水作為樣品的提取溶劑；由于四川豆瓣中含有較多油脂及蛋白質(zhì)，實(shí)驗(yàn)采用將樣品溶液加入亞鐵氰化鉀及乙酸鋅沉淀去除蛋白質(zhì)后，過 0.45µm 濾膜進(jìn)樣的方式。

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