2 結(jié)果與分析

2.1 干貝多糖蛋白質(zhì)脫除的結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)中，在多糖提取物不被顯著降解的條件下去除結(jié)合的蛋白質(zhì)，以提高多糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)是十分必要的。1.3.1中得到的DAMP的多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(53±0.58)％，蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(39.09±0.88)％。經(jīng)4種蛋白質(zhì)脫除方式處理后，多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)、蛋白質(zhì)脫除率和多糖損失率見(jiàn)表1。多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)由高到低分別為：TCA法＞稀堿法＞堿酶酶解法＞GDL法。其中，TCA組多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于其他3組。蛋白質(zhì)脫除率及多糖損失率由高至低依次為：TCA法＞稀堿法＞堿酶法＞GDL法。結(jié)合多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)、蛋白脫除率與多糖損失率分析可得，TCA法脫蛋白質(zhì)最有效，但多糖損失嚴(yán)重；DAMP經(jīng)稀堿法與酶解法處理后，多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)無(wú)顯著差別，但稀堿組蛋白質(zhì)脫除率及多糖損失率顯著高于酶解組；經(jīng)GDL法處理后，多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)及蛋白質(zhì)脫除率均顯著低于其他方式，多糖損失率也最少。

2.2 單糖組成分析

由表2可知，堿酶組多糖含有Man、GlcN、GalUA、Glc、Gal、Am；稀堿組多糖含有GlcN、Glc、Gal；TCA組多糖含有GlcN、GalUA、Glc；GDL組多糖含有Man、GlcN、Rha、GalUA、Glc。不同蛋白質(zhì)脫除方式所得多糖的單糖組成略有差別，稀堿組和堿酶組多糖中的半乳糖醛酸在堿性環(huán)境中生成半乳糖，而TCA法和GDL法多糖中檢測(cè)到半乳糖醛酸，未檢測(cè)到半乳糖。各組數(shù)據(jù)中，葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)均最高。據(jù)報(bào)道，海灣扇貝多糖組分為中性多糖和酸性多糖，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

2.3 氨基酸組成分析

為了明確不同脫除方式處理的扇貝多糖中殘留蛋白質(zhì)的情況，以及這些蛋白質(zhì)與抗氧化活性之間的關(guān)系，對(duì)4種方式脫蛋白后的干貝多糖進(jìn)行了氨基酸組成分析，結(jié)果顯示：干貝多糖中的總氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15～160mg/g，堿酶組和稀堿組均檢測(cè)山16種氨基酸，TCA組和GDL組均檢測(cè)出14種氨基酸，可見(jiàn)氨基酸種類(lèi)齊全。由表4可知，堿酶組的親水氨基酸及極性氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，非極性氨基酸及必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低，疏水性氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最低；稀堿組的疏水氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低，其他4種氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)均最低；TCA組的疏水性氨基酸、非極性氨基酸與必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，親水性氨基酸與極性氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低；GDL組的親水性氨基酸和極性氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，疏水性氨基酸、非極性氨基和必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高。

2.4 剛果紅試驗(yàn)分析

由圖1可知，在氫氧化鈉的濃度為0～0.1mol/L時(shí)，對(duì)照組(剛果紅)的最大吸收波長(zhǎng)逐漸減小，GDL組和堿酶組多糖與剛果紅結(jié)合生成的絡(luò)合物的最大吸收波長(zhǎng)隨NaOH濃度的增大紅移明顯發(fā)生，表明GDL組和堿酶組多糖存在三螺旋結(jié)構(gòu)，TCA組和稀堿組多糖不具有三螺旋結(jié)構(gòu)，可能是DAMP在堿液、酸液處理過(guò)程中，維持穩(wěn)定三螺旋結(jié)構(gòu)作用的分子內(nèi)、分子間氫鍵受到破壞，導(dǎo)致三螺旋結(jié)構(gòu)變性。

相關(guān)鏈接：氨基酸，多糖，氫氧化鈉，半乳糖醛酸

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