(3)規(guī)范曲線方程
選用明確的色譜儀標準,各自對不一樣濃度值索馬甜標液開展測量,以規(guī)范溶液的濃度為橫坐標軸,相匹配的峰總面積為縱軸,創(chuàng)建標曲,結果如圖所示3所顯示。所得的索馬甜規(guī)范曲線方程為Y=3.62568X-47.04715,相關系數r為0.9983,說明在10~500mg/L濃度值范疇內其線性相關優(yōu)良。
(4)方法檢出限及定量限
反復測量20次含有10mg/L索馬甜的栽培基質試品,以結果相對標準偏差的3倍測算出方式的方法檢出限為1.6mg/L,以結果相對標準偏差的10倍測算出定量限為5.3mg/L,說明該辦法能達到食品類中甜味素的檢查規(guī)定。
(5)利用率和精度
選用文中所確立的辦法對市面上的15個批號的飲料類商品(包含炭酸類飲品可口可樂、可樂,茶類飲料綠茶、綠茶葉、花草茶,果肉飲料,維他命飲品)開展剖析檢驗,均未發(fā)覺索馬甜的驗出,與其說商品標簽成份中未明確應用索馬甜的狀況一致。
為認證辦法的可行性分析,進一步對飲品試品開展加標實驗。在這里全過程發(fā)覺,立即向各種飲品中添加索馬甜,均沒法驗出,剖析其根本原因可能是因為各種飲品中高濃的糖成分造成蛋白質聚沉所致使的,因而,加標回收實驗均是在對飲品開展10倍稀釋液后的根基上加上。不一樣試品的索馬甜加標實驗超高效率液相色譜儀結果如圖4所顯示,索馬甜加標回收率及精度實驗結果見表1。
依據表1結果,不一樣試品索馬甜加標回收率在82.8%~102.3%,相對性相對標準偏差均在6%之內,說明該辦法有著優(yōu)良的準確性和可重復性。
2、SDS-PAGE統(tǒng)計分析方法的創(chuàng)建
SDS-PAGE是剖析蛋白常見的方式 ,可以完成判定及半定量分析。配置不一樣含量的索馬甜蛋白質水水溶液,其SDS-PAGE結果如圖所示5所顯示。
由圖5能夠看得出,索馬甜蛋白質雜帶超出20kD,與資料中消息的相對分子質量22kD尺寸符合,伴隨著含量的擴大雜帶色調慢慢加重、雜帶變大,在其中濃度值為10mg/L時,蛋白質雜帶若隱若現,濃度值為提升至25mg/L時,雜帶已更為清楚、顯著,不難看出,SDS-PAGE法達到GB2760-2014較大容許需求量0.025g/kg的剖析規(guī)定。
對各種飲品開展10倍稀釋液后任意加上不一樣濃度值索馬甜標液,依照上述情況的電泳分析方式實現解決并電泳原理,其效果如圖所示6所顯示。由圖上能夠看得出,各加標試品電泳條帶與索馬甜規(guī)范試品一致,不難看出運用SDS-PAGE法可以完成對飲品中索馬甜開展剖析。
三、結果
本畢業(yè)論文各自根據超高效液相色譜色譜分析和SDS-PAGE法創(chuàng)建了飲品中索馬甜的剖析測試標準。根據試品加標試驗,結果顯示這兩種方式均可完成對飲品中索馬甜的檢驗,其敏感度都可以達到GB2760-2014中較大限制值應用的檢查規(guī)定。除此之外,針對比較繁雜的栽培基質試品,根據選用這兩種辦法開展互相證明,可以得到更加穩(wěn)定的結果。