2.2.4 線性相關(guān)調(diào)查

各自高精密汲取混和標(biāo)準(zhǔn)品水溶液1、5、10、15、20、25、30μL引入高效率液相色譜中，按以上色譜儀標(biāo)準(zhǔn)剖析。以峰總面積（Y）為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)軸，制作標(biāo)曲，獲得的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)r各自為：Y=2×109X-23 374,r=0.999 9;Y=6×108X-18 200,r=0.999 5;Y=4×108X-13 246,r=0.999 3；說(shuō)明原兒茶酸在0.021 95～0.658 5μg，兒茶酸在0.047 2～1.416μg，表兒茶素在0.041 5～1.245μg時(shí)，峰總面積與進(jìn)樣量呈優(yōu)良的線性相關(guān)。

2.2.5精度實(shí)驗(yàn)

高精密汲取混和標(biāo)準(zhǔn)品水溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)反復(fù)氣相6次，結(jié)果原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為0.35%、0.45%、1.83%，說(shuō)明儀器設(shè)備精度優(yōu)良。

2.2.6 可靠性實(shí)驗(yàn)

取試品粉末狀1.0 g，高精密稱取，按“2.2.3”項(xiàng)下方式制取供試品水溶液，室內(nèi)溫度置放，各自于0、2、4、6、8、13、24 h氣相測(cè)量，結(jié)果原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為1.52%、1.76%、1.15%，表明試品在24 h內(nèi)平穩(wěn)。

2.2.7 可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取同一試品粉末狀6份，每一份1.0 g，高精密稱取，按“2.2.3”項(xiàng)下方式制取供試品水溶液，氣相測(cè)量，數(shù)據(jù)顯示原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素峰總面積的RSD各自為0.91%、0.61%、0.65%，說(shuō)明可重復(fù)性優(yōu)良。

2.2.8 加樣利用率實(shí)驗(yàn)

取己知成分的試品粉末狀6份，每一份1.0 g，高精密稱取，各自高精密添加原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品，按“2.2.3”項(xiàng)下方式制取供試品水溶液并測(cè)量，測(cè)算加樣利用率。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.9 試品的含量測(cè)量

取雞血藤手鐲粉末狀1.0 g，高精密稱取，每次中藥材平行面3份，按“2.2.3”項(xiàng)下方式制取供試品水溶液并舉樣測(cè)量，并測(cè)算成分。結(jié)果見(jiàn)表3和圖2。

2.3 芒柄花素、染料木素成分

測(cè)量參考梁永樞等[10]方式完成測(cè)量。

2.3.1 色譜儀標(biāo)準(zhǔn)

Waters Xselect C18色譜柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；流動(dòng)性相：0.1%H3PO4-乙腈（66∶34），等度過(guò)柱；檢驗(yàn)光波長(zhǎng)：254 nm；流動(dòng)速度：1 m L·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL。標(biāo)準(zhǔn)品及供試品水溶液色譜見(jiàn)圖3。

2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)品水溶液的制取

各自高精密稱取染料木素和芒柄花素標(biāo)準(zhǔn)品1.90、1.19 mg，加工業(yè)甲醇滴定劑至5 m L，做成標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。各自高精密汲取染料木素、芒柄花素標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液1 m L，滴定劑至5 m L做為混和標(biāo)準(zhǔn)品水溶液。

2.3.3 供試品水溶液的制取

取試品粉末狀約1 g，高精密稱取，加70%酒精30 m L加溫流回獲取2次，每一次15 min，合拼2次萃取液，緩解壓力回收利用有機(jī)溶劑至干，沉渣加工業(yè)甲醇滴定劑于5 m L深棕色量瓶中，混勻，做為供試品水溶液。

2.3.4 標(biāo)曲的制取

各自汲取“2.3.2”項(xiàng)下各標(biāo)準(zhǔn)品水溶液20μL引入液相色譜中，測(cè)量峰總面積積分值。以峰總面積（Y）為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)品的進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)軸，制作標(biāo)曲，得線性回歸方程與相關(guān)系數(shù)r各自為：Y=8×109X-192 794,r=0.999 9;Y=6×109X-99 356,r=1；說(shuō)明染料木素在0.076～2.28μg，芒柄花素在0.047 6～1.42μg時(shí)，峰總面積與進(jìn)樣量呈優(yōu)良的線性相關(guān)。

2.3.5 精度試驗(yàn)

高精密汲取標(biāo)準(zhǔn)品水溶液20μL，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)反復(fù)氣相6次，結(jié)果染料木素、芒柄花素的RSD各自為1.15%、0.95%，說(shuō)明儀器設(shè)備精度優(yōu)良。