滿山紅來自杜鵑科杜鵑屬綠色植物興安杜鵑(Rhododendron dauricum L.)的葉。滿山紅在治療咳喘層面作用突顯,常見來醫(yī)治慢性支氣管炎,漫性急性支氣管炎等[2]。滿山紅以黃酮類類、香豆素類、有機(jī)物類、桂皮醛類等成分為主導(dǎo),在其中藥力功效突顯的是黃酮類化合物、多糖類[3],包含杜鵑花素、三奈酚、金絲桃苷等。中草藥帶有的成分繁雜,危害其成分類型和成分的要素也許多,因而必須標(biāo)準(zhǔn)中草藥的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。中藥材指紋圖譜能夠 使獲得的有效化學(xué)信息利潤最大化,具有把控中藥材商品的品質(zhì)的功效[4]。因而創(chuàng)建中藥材指紋圖譜實(shí)際意義重特大,也為事后中草藥科學(xué)研究打下基礎(chǔ)。
1 儀器設(shè)備與原材料
1.1 關(guān)鍵儀器設(shè)備
英國Agilent企業(yè)的1260型高效率液相色譜;英國THERMO企業(yè)的G10S UV-Vis型紫外線光度計(jì);昆山市超聲波儀器設(shè)備公司的KQ-250DE型醫(yī)療數(shù)控機(jī)床超聲波清洗器;法國賽多利斯企業(yè)的BP211D型天平秤(d=0.01 mg);天津泰斯特儀器設(shè)備公司的98-1-B型電子器件溫度控制電加熱套。
1.2 試驗(yàn)原材料
1.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
試驗(yàn)中高效率液相色譜應(yīng)用的是英國Fishers企業(yè)生產(chǎn)制造的色譜儀級工業(yè)甲醇、乙腈和苯甲酸,水為超純水系統(tǒng);此外試驗(yàn)使用的實(shí)驗(yàn)試劑為分析純。
1.2.2 試藥
杜鵑花素(生產(chǎn)批號:201605)為中國藥品生物制藥檢定所生產(chǎn)制造。
1.2.3 中藥飲片來源于
滿山紅中藥材購于黑龍江省五林、黑龍江省林口、吉林通化,每一個(gè)原產(chǎn)地5批中藥材,分別是五林01~05、林口01~05、通化01~05,共15批,序號分別是S1~S15。由中科院長春市應(yīng)用化學(xué)研究室質(zhì)譜分析核心皮面鳳副研究員評定為興安杜鵑Rhododendron dauricum L.葉。
2 方式與結(jié)果
2.1 標(biāo)準(zhǔn)品水溶液的制取
將杜鵑花素標(biāo)準(zhǔn)品高精密稱重,加入適量工業(yè)甲醇做成每1 mL含0.1 mg的水溶液,即得。
2.2 供試品水溶液的制取
采用滿山紅葉100 g,選用流回法獲取2回,第一回添加12倍水,置放30 min,流回獲取30 min,過200目壓濾機(jī)濾布,滲瀝液預(yù)留;殘?jiān)?回添加10倍水,獲取20 min,過200目壓濾機(jī)濾布,合拼2次滲瀝液,緩解壓力濃縮至500 mL,干凍,取干凍粉0.1 g,添加20 mL水超聲波獲取(輸出功率100W,頻率40 KHz)60 min,放到室內(nèi)溫度,混勻,過0.45 μm的微孔濾膜,即得。
2.3 色譜儀標(biāo)準(zhǔn)的明確
2.3.1 色譜儀標(biāo)準(zhǔn)
選用Shim-Pack XR-ODS Ⅲ (2.0 mmi.d×150 mm)離子交換柱,用工業(yè)甲醇-0.3%苯甲酸溶液為流動(dòng)性相系統(tǒng)軟件梯度方向過柱,流動(dòng)速度為0.2 mL·min-1,梯度方向過柱,檢驗(yàn)光波長為297 nm,柱溫為25 ℃,氣相量為10 μL。梯度方向見表1。
2.3.2 空缺有機(jī)溶劑影響調(diào)查
將工業(yè)甲醇做為空缺有機(jī)溶劑,依照“2.3.1”項(xiàng)色譜儀標(biāo)準(zhǔn),逐漸檢驗(yàn)。滿山紅葉的指紋圖譜不會(huì)受到空缺有機(jī)溶劑危害。見圖1。
2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品和供試品峰核對
將“2.1”項(xiàng)的標(biāo)準(zhǔn)品水溶液和“2.2”項(xiàng)的供試品水溶液,依照“2.3.1”項(xiàng)的色譜儀標(biāo)準(zhǔn),用高效率液相色譜檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)顯示選定中藥材中帶有杜鵑花素。標(biāo)準(zhǔn)品色譜見圖2,供試品色譜見圖3。