維他命C又被稱為L(zhǎng)-抗壞血酸,是人體正常生理學(xué)新陳代謝所不可缺少的一種維他命,能控制身體氧化還原反應(yīng)新陳代謝反映,提高身體對(duì)外部條件的抗應(yīng)激反應(yīng)工作能力及其抵抗能力,新鮮水果中VC成分豐富多彩,是身體VC關(guān)鍵攝入來源于之一。現(xiàn)階段,測(cè)量VC的辦法有高效液相色譜色譜法、熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、電化學(xué)分析法,文中選用紫外線-由此可見光度法對(duì)VC的可靠性、最好獲取標(biāo)準(zhǔn)和10種常見水果的VC成分開展了調(diào)查與測(cè)量,為大家評(píng)定水果營(yíng)養(yǎng)使用價(jià)值及存儲(chǔ)方法給予一定的參照。
1原材料與方式
1.1原材料
奇異果、冰糖橙、橘子、橘子、草莓苗、油桃、紅心火龍果、菠蘿蜜、梨、iPhone均購自某農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場(chǎng);抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(AR);冰乙酸(AR);硫酸銨(AR);硫酸(AR);鹽酸(AR)。
1.2儀器設(shè)備
UV759CRT紫外線-由此可見光度計(jì)(上海佑科儀器設(shè)備有限責(zé)任公司);JY電子分析天平(上海市方瑞儀器設(shè)備有限責(zé)任公司);GZX-9246數(shù)顯式鼓風(fēng)干燥箱(上海博迅實(shí)業(yè)公司有限責(zé)任公司)。
1.3獲取生產(chǎn)流程
新鮮水果試品→去蒂、清理→碾磨成勻漿→稱量試件→添加獲取劑→遮光自然環(huán)境下萃取法→4000r/min離心式解決→紫外線-由此可見光譜分析儀測(cè)量(243nm)其OD值→測(cè)算品質(zhì)
1.4實(shí)驗(yàn)方法
精確稱量5.0000g預(yù)備處理后的試品勻漿于燒瓶中,按料液比(g∶mL)1∶2的比率添加2%冰醋酸水溶液,在室內(nèi)溫度(20℃)遮光自然環(huán)境中萃取法30min,將萃取法液在4000r/min標(biāo)準(zhǔn)下離心式解決10min,取頂層發(fā)酵液滴定劑至100mL容量瓶后,用紫外線由此可見光度計(jì)在較大消化吸收光波長(zhǎng)243nm處測(cè)量OD值。每一組樣品做七次平行面實(shí)驗(yàn),取其均值,依據(jù)維他命C標(biāo)曲測(cè)算得到試品中維他命C的成分。
1.5紫外線消化吸收曲線圖的測(cè)量
為了更好地調(diào)查試品維他命C的成分,選用含量為0.08mg/mL的規(guī)范運(yùn)用液和試品水溶液在紫外線-由此可見光度計(jì)上開展光波長(zhǎng)掃描儀,紫外線消化吸收曲線圖見圖1和圖2。
由圖1及圖2能夠 看得出維他命C標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的λmax=243nm,新鮮水果試品的λmax=244nm,他們的最高消化吸收光波長(zhǎng)基本上一致,這表明維他命C在酸性溶液中的最高消化吸收光波長(zhǎng)為243nm。
1.6結(jié)果測(cè)算
將待測(cè)液的OD值值帶入維他命C標(biāo)曲,查出來被測(cè)試品濃度值,再依據(jù)計(jì)算公式出試樣中VC的成分。
2結(jié)果與探討
2.1VC獲取正交試驗(yàn)結(jié)果剖析
根據(jù)對(duì)料液比、冰醋酸濃度值、獲取時(shí)間、獲取溫度等單要素對(duì)VC獲取實(shí)際效果的剖析,開展正交試驗(yàn)。為了更好地明確最好獲取實(shí)際效果,以萃取液在λmax=243nm處OD值為評(píng)定指標(biāo)值,對(duì)之上四個(gè)要素設(shè)計(jì)方案L9(34)正交試驗(yàn),要素水準(zhǔn)表見表1,正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。
由表2能夠 看得出,之上四個(gè)要素對(duì)VC獲取實(shí)際效果的不良影響的層次次序先后為A>B=C>D,即:料液比>冰醋酸濃度值=獲取時(shí)間>獲取溫度。從正交和分析數(shù)據(jù)能夠 得到,維他命C的較佳獲取標(biāo)準(zhǔn)為A1B1C1D1,即:料液比1∶2(g∶mL)、冰醋酸濃度值2%、獲取時(shí)間30min及其獲取溫度20℃。
2.2維他命C標(biāo)曲的制作
本試驗(yàn)選用紫外線-由此可見光度法對(duì)VC的成分開展了測(cè)量,將1mg/mL的VC規(guī)范貯備液梯度方向稀釋液為0.02,0.04,0.08,0.12,0.16,0.20mg/mL的系列產(chǎn)品水溶液各自檢驗(yàn)其OD值。以濃度值為橫坐標(biāo)軸,OD值為縱軸制作維他命C標(biāo)曲(見圖3)。
由圖3能夠 看得出,維他命C在含量為0.02~0.20mg/mL中間合乎朗伯-梅爾斯基本定律,有優(yōu)良的線性相關(guān),所得的線性回歸方程為Y=3.7994X-0.0066;相關(guān)系數(shù)rR2=0.9996。
2.3試品的含量測(cè)量
選擇水果橘子、草莓苗、橘子、火龍果等10種試品測(cè)量在其中VC的成分,依據(jù)不一樣新鮮水果試品下測(cè)定的OD值,在維他命C標(biāo)曲中讀取獲取濃度值,測(cè)算得到不一樣新鮮水果試品獲取品質(zhì)的柱型關(guān)系圖,如圖所示4。
由圖4能夠 得到,新鮮水果試品中維他命C成分次序?yàn)槠娈惞?407.58mg/100g)>冰糖橙(390.86mg/100g)>橘子(319.31mg/100g)>橘子(284.65mg/100g)>火龍果(253.32mg/100g)>草莓苗(244.76mg/100g)>油桃(201.01mg/100g)>菠蘿蜜(181.44mg/100g)>梨(170.95mg/100g)>iPhone(144.95mg/100g)。
2.4方法檢出限
各自測(cè)量實(shí)驗(yàn)試劑空缺8組,其OD值值見表2.3,在置信度約為99%時(shí),其方法檢出限MDL=t(n-1.099)×S=0.003mg/mL。
2.5精度
試驗(yàn)對(duì)10種水果試品各自制取七個(gè)平行面樣,檢驗(yàn)其OD值,測(cè)算成分。測(cè)得相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在0.09%~0.58%中間,精度不錯(cuò)。
2.6加標(biāo)回收率
選用試品加標(biāo)底方式開展加標(biāo)回收率測(cè)量,取三份試品添加不一樣含量的標(biāo)液測(cè)量其OD值,平行測(cè)定6組,加標(biāo)回收率在96.6%~106.8%中間。
3結(jié)果
文中選用紫外光光度法對(duì)日常生活常見的水果中VC的成分開展檢測(cè)剖析,結(jié)果顯示較低濃度的的冰醋酸在冷凍遮光的標(biāo)準(zhǔn)下對(duì)維他命C具備一定的保障功效。根據(jù)單要素研究和正交試驗(yàn)得到:料液核對(duì)VC萃取法實(shí)際效果危害很大,溫度對(duì)獲取實(shí)際效果危害較小,料液比1∶2(g∶mL),濃度值2%,時(shí)間30min,溫度為20℃時(shí)是最好獲取標(biāo)準(zhǔn)。測(cè)量結(jié)果顯示:奇異果中VC成分較高,為407.58mg/100g,iPhone中的VC成分相比較低,為144.95mg/100g。該方法檢出限為0.003mg/mL,RSD<1%,利用率在96.6%~106.8%中間,本方式檢驗(yàn)新鮮水果中VC的成分能夠 獲得不錯(cuò)的結(jié)果。