2.5加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

取1mg/mL混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液50、200uL、1.0mL于10mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇各自稀釋液成5.0、20.0、100.0ug/mL三個(gè)濃度梯度的混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液。每一種栽培基質(zhì)做低、中、高三個(gè)濃度值加標(biāo)：每一個(gè)梯度方向取200uL混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液各自添加膠襄、片狀和片劑空缺栽培基質(zhì)試品里將片狀、片劑和膠襄(內(nèi)容物)試品細(xì)膩碾磨，獲得勻質(zhì)試品后稱(chēng)重，稱(chēng)量0.1000g上下試品于100mL容量瓶中，添加工業(yè)甲醇適當(dāng)，超聲波獲取30min，制冷至室內(nèi)溫度，用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺，混勻，靜放，取上清液經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜過(guò)慮，取滲瀝液被測(cè)。若呈陽(yáng)性試品濃度值超過(guò)線形范疇則用工業(yè)甲醇按一定占比稀釋液后再測(cè)。每一個(gè)梯度方向檢驗(yàn)三組平行面試品。離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C₁₈離子交換柱，規(guī)格型號(hào)50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負(fù)離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測(cè)→信息內(nèi)容依賴感獲得→加強(qiáng)型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi開(kāi)展加標(biāo)回收率測(cè)量。30種總體目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)加標(biāo)回收率及相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，結(jié)果顯示，30種化學(xué)物質(zhì)的利用率在84.5％～104.7％中間，RSD均低于5.0％，加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)精度優(yōu)良。

2.6精度和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液可靠性實(shí)驗(yàn)

精準(zhǔn)汲取50μL混和標(biāo)液將30種違規(guī)加上藥品各自稱(chēng)量約10mg，放置10mL容量瓶中，11種那非類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中添加一定量的乙腈超聲波融解后滴定劑，其他標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)添加一定量工業(yè)甲醇超聲波融解后滴定劑，均配置成濃度值約為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)貯備液，并存放于-4℃冰柜中。
混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液的配制：各自精準(zhǔn)汲取30種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)貯備液適黃于一個(gè)100mL容量瓶中，用工業(yè)甲醇稀釋液攪拌后滴定劑。使?jié)舛戎禐?～10μg/mL的混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液，待應(yīng)用時(shí)進(jìn)一步稀釋液。于10mL容最瓶，用工業(yè)甲醇稀釋液，配置成含量為5～100ng/mL的混和標(biāo)液，離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C₁₈離子交換柱，規(guī)格型號(hào)50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。

離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負(fù)離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測(cè)→信息內(nèi)容依賴感獲得→加強(qiáng)型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi持續(xù)氣相6次，測(cè)量30種化學(xué)物質(zhì)定量分析正離子質(zhì)問(wèn)潛峰總面積的相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。將濃度值為5～100ng/mL的混和標(biāo)液在遮光冷凍0、1、2、4、8、12、24h后各自離子交換柱：PhenomenexKjneLex-C18色譜柱，規(guī)格型號(hào)50mm×2.1mm，2.6μm；柱溫：40℃；流動(dòng)性相：A為乙腈，B為10mmol/L乙酸銨溶液；梯度方向過(guò)柱：0～7min，10％A～90％A，7～8min，90％A，8～8.1min，90％A～10％A，8.1～10min，10％A；流動(dòng)速度：250μL/min；進(jìn)樣量：1μL。

離子源：TurboV電噴霧器離子源(ESI)；逐行掃描：正、空氣負(fù)離子與此同時(shí)掃描儀，按時(shí)多反映檢測(cè)→信息內(nèi)容依賴感獲得→加強(qiáng)型子離子掃描儀(ScheduledMRM→TDA→EP)；掃描儀范疇：50～650Da；氣簾氣(CUR)：30psi；撞擊氣(CAD)：High；噴霧器工作電壓(IS)：5500V/-4500V；離子源溫度：550℃；做霧化氣(GASl)：55psi；輔助氣(GAS2)：55psi方式檢驗(yàn)，以獲取的30種日標(biāo)物定量分析離子對(duì)質(zhì)譜分析岡峰而積測(cè)算其RSD。結(jié)果顯示，本方式中30種違規(guī)加上藥品的精度(RSD)為0.8％～5.6％，均低于6％，精度優(yōu)良，且混和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液在24h內(nèi)平穩(wěn)。

2.7試品檢驗(yàn)

選用本方式對(duì)50批號(hào)消除疲勞類(lèi)和提高睡眠質(zhì)量類(lèi)保健產(chǎn)品開(kāi)展檢驗(yàn)，外標(biāo)法定量分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，驗(yàn)出呈陽(yáng)性試品共8批號(hào)，定量分析結(jié)果見(jiàn)表5。每批號(hào)呈陽(yáng)性試品最少與此同時(shí)驗(yàn)出二種違規(guī)加上藥品，在其中驗(yàn)出數(shù)最多的化學(xué)物質(zhì)是硝西泮和炯酸，各驗(yàn)出5批號(hào)，次之是他達(dá)那非，共驗(yàn)出3批號(hào)，氯硝西泮、文法拉辛、硫代艾地那非各驗(yàn)出2批號(hào)，氯苯那敏驗(yàn)出1批號(hào)。全部呈陽(yáng)性試品EPI譜圖均歷經(jīng)EPI數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(2.3)核對(duì)確診，以Fit、RevFit和Purity三個(gè)主要參數(shù)表明查找結(jié)果，其標(biāo)值反映與總體目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)的搭配水平。在其中FiL(F)意味著正符合率，即標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜峰與試品譜峰的相似性，最高值為100，值越大表明是該化學(xué)物質(zhì)的概率越大；RevFit(R)意味著反符合率，即試品譜圖與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜圖的相似性；Purity(P)意味著純凈度，是綜合性前二種結(jié)果得到的標(biāo)值，即試品譜圖與數(shù)據(jù)表中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)譜圖之問(wèn)在質(zhì)量數(shù)、進(jìn)化速率等主要參數(shù)層面的相似性。EPI數(shù)據(jù)庫(kù)查詢搜庫(kù)結(jié)果中總體目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)依照P值從大到小的排列順序；一部分呈陽(yáng)性試品質(zhì)譜分析對(duì)比分析見(jiàn)圖3。

3結(jié)果

本試驗(yàn)選用高效率液相色譜儀-三重四極桿復(fù)合型正離子阱質(zhì)譜分析(HPLC-QTRAP-MS)對(duì)消除疲勞類(lèi)和提高睡眠質(zhì)量類(lèi)保健產(chǎn)品中30種違規(guī)加上藥品創(chuàng)建了快速檢測(cè)方式。在8min之內(nèi)完成了對(duì)30種化學(xué)物質(zhì)的檢驗(yàn)。該方式采用乙腈-10mmoL/L乙酸銨水溶液做為流動(dòng)性相，PhenomenexKinetexC18(50mm×2.1mm，2.6μm)柱為離子交換柱實(shí)現(xiàn)分離出來(lái)；采用按時(shí)多反映檢測(cè)(SchedulenedMRM)方式下的正、負(fù)離轉(zhuǎn)換方法開(kāi)展定量分析檢測(cè)分析；采用按時(shí)多反映臨測(cè)(ScheduledMRM)-信息內(nèi)容依賴感收集(IDA)-提高子離子掃捕(EPI)逐行掃描，在定性分析的與此同時(shí)得到3個(gè)工作能力等級(jí)的二級(jí)殘片正離子質(zhì)譜圖復(fù)合型而成的加強(qiáng)型二級(jí)殘片正離子(EPI)質(zhì)譜圖，創(chuàng)建30種化學(xué)物質(zhì)的EPI數(shù)據(jù)庫(kù)查詢，開(kāi)展判定確診。

本方式選用正空氣負(fù)離子與此同時(shí)逐行掃描，能夠一起檢驗(yàn)30種違規(guī)加上藥品，加速了檢查速率；挑選ScheduledMRM收集方法，取得最好色譜儀峰開(kāi)展定性分析，提升 了檢驗(yàn)敏感度和定量分析精確性；創(chuàng)建了EPI數(shù)據(jù)庫(kù)查詢用以呈陽(yáng)性確診和結(jié)構(gòu)特征，保證了判定精確性；提升了搜庫(kù)核對(duì)流程，設(shè)定操作系統(tǒng)全自動(dòng)轉(zhuǎn)換正離子阱方式，線上收集EPI圖普，測(cè)算核對(duì)結(jié)果，減少剖析時(shí)問(wèn)，加速判定速率。本方式達(dá)到了一針氣相與此同時(shí)對(duì)30種違規(guī)加上藥品開(kāi)展定量分析、判定和確診，具備擴(kuò)散系數(shù)大、速度更快、實(shí)際操作簡(jiǎn)單、敏感度高、精確性強(qiáng)能的特性，為新時(shí)期的保健品管控給予合理的服務(wù)支持。