5、最陡上坡試驗(yàn)
挑選適宜的步幅,對(duì)X2、X2、X6,3個(gè)明顯要素開展最陡上坡試驗(yàn),結(jié)果如表3所顯示,隨X2,X2,X6成分的提升,發(fā)酵物中黑色素OD值值(Y)先上升后減少,在第3組做到最大,因而以第3組濃度值做為響應(yīng)面試驗(yàn)的定位點(diǎn)。
6、響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)及結(jié)果
依據(jù)最陡上坡試驗(yàn)結(jié)果,對(duì)X2,X2,X6開展響應(yīng)面設(shè)計(jì)方案,各要素水準(zhǔn)如表4所顯示,響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果如表5所顯示。對(duì)試驗(yàn)結(jié)論開展數(shù)學(xué)方程線性擬合,獲得黑色素吸光度值(Y)與3個(gè)顯著性差異要素的二次回歸分析:
吸光度值=1.0037 0.0204X2 0.0489X4 0.0442X6-0.1100X2X2-0.0925X4X4-0.1522X6X6-0.0132X2X4 0.0595X2X6 0.0640X4X6
有回歸分析的方差分析(表6)得知:F=8.08、P=0.017(P<0.05)表明回歸分析明顯,決定系數(shù)R2=0.9357(R2>0.85),失擬項(xiàng)P=0.052(P>0.05)表明失擬項(xiàng)不明顯、回歸分析擬合程度優(yōu)良。由表7得知X2X2,X4X4的P值低于0.05,說(shuō)明NaN03、MgS04·7H20的二次項(xiàng)模型擬合具備明顯危害,X6X6的P值低于0.01,說(shuō)明CS的二次項(xiàng)模型擬合具備極明顯危害,而一次項(xiàng)和交互項(xiàng)的顯著性差異較弱,也證實(shí)了各要素與響應(yīng)值中間并不是線性相關(guān)。
運(yùn)用Minitabl7獲得該實(shí)體模型X2、X4、X6的極大值各自為0.1313、0.3333、0.2323,融合最陡上坡實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)的基本原理獲得X2、X4、X6的實(shí)際值各自為0.6803、0.0366、14.4646,操作過(guò)程中可用X2=0.68、X4=0.037、X6=14.5,故提升后的發(fā)醇培養(yǎng)液的成份為:NaNO3 0.68g/L,K2HPO4 0.48g/L,MgSO4·7H2O 0.037g/L,CaCl2·2H2O 0.036g/L,葡萄糖水18g/L,CS14.5mL/L,TM1mL/L。歷經(jīng)可重復(fù)性試驗(yàn)獲得提升后培養(yǎng)液中黑色素OD值數(shù)值1.004,是提升前0.612的1.64倍。
三、結(jié)果
(1)細(xì)菌DT06造成的淡黃色黑色素是一種新黑色素,為多甲基化學(xué)物質(zhì)。
(2)DT06黑色素有優(yōu)良的抗氧化和可靠性,具備潛在性使用使用價(jià)值。
(3)培養(yǎng)液提升后DT06黑色素的生產(chǎn)量是提升前的1.64倍。