以α-羥基-谷氨酸為內(nèi)標(biāo)物，創(chuàng)建了堿水解反應(yīng)-高效液相色譜色譜分析測(cè)量嬰幼兒配方奶粉及獨(dú)特醫(yī)藥學(xué)主要用途寶寶秘方食品類中谷氨酸成分的方式 。試品經(jīng)堿溶液水解反應(yīng)，C18柱分離出來(lái)，瑩光探測(cè)器檢驗(yàn)；內(nèi)標(biāo)法定量分析，校準(zhǔn)水解反應(yīng)全過(guò)程谷氨酸的損害，減少栽培基質(zhì)相互間的差別，提升定量分析結(jié)果的精確性；在普遍試品成分水準(zhǔn)加標(biāo)，試品的利用率為92.5%~97.4%中間，相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<3.11%，試驗(yàn)室間誤差＜6.7%。方式使用簡(jiǎn)易、精確度高，可重復(fù)性好，適用嬰幼兒配方奶粉及獨(dú)特醫(yī)藥學(xué)主要用途寶寶秘方食品類中谷氨酸的精確判定定量分析。

谷氨酸是身體的必須氨基酸之一，參加人體蛋白的生成和新陳代謝調(diào)整，它是維生素b3、5-5羥色胺、褪黑色素等生物活性成分的磷酸激酶物，危害蛋白、糖原和人體脂肪等營(yíng)養(yǎng)元素的新陳代謝。當(dāng)身體欠缺谷氨酸的時(shí)候會(huì)造成肌膚疾病、玻璃體衰退及心肌纖維化等癥狀。相比于成年人，嬰兒階段成長(zhǎng)發(fā)育快速，在該階段谷氨酸以及類化合物對(duì)腦部的生長(zhǎng)發(fā)育和對(duì)進(jìn)餐-飽腹、睡眠質(zhì)量-覺醒規(guī)律性等神經(jīng)系統(tǒng)個(gè)人行為調(diào)整發(fā)展趨勢(shì)尤為重要，因而一定要確保嬰幼兒食品中營(yíng)養(yǎng)元素的占比和品質(zhì)。針對(duì)消化阻礙、代謝紊亂或特殊病癥情況的小孩對(duì)營(yíng)養(yǎng)或飲食有更加特別的要求。

嬰幼兒配方奶粉和獨(dú)特醫(yī)藥學(xué)主要用途寶寶秘方食品類做為特殊群體的食品來(lái)源于，其營(yíng)養(yǎng)元素構(gòu)成在國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)上都有特別要求，對(duì)谷氨酸的占比和加上方式都是有相應(yīng)的規(guī)定，但缺少相對(duì)應(yīng)的檢查辦法規(guī)范?，F(xiàn)階段，測(cè)量谷氨酸的檢查辦法有包含光度法、電解法、碳水化合物檢測(cè)儀法、高效液相色譜色譜法、液相色譜儀串聯(lián)質(zhì)譜法和離子色譜法等，液相色譜儀方式的非特異和定量分析精確性均有優(yōu)點(diǎn)。谷氨酸多以蛋白的方式出現(xiàn)于試品中，需水解反應(yīng)為化合態(tài)后才可以測(cè)量?，F(xiàn)階段一般采取的堿水解反應(yīng)方式長(zhǎng)期在高溫、濃度較高的燒堿溶液標(biāo)準(zhǔn)下開展，谷氨酸有一定損害，且在不一樣的栽培基質(zhì)中谷氨酸的損害水平不完全一致。

本分析在經(jīng)典堿水解反應(yīng)方式的根基上引進(jìn)構(gòu)造與谷氨酸類似的內(nèi)標(biāo)物α-羥基谷氨酸，以內(nèi)標(biāo)法定量分析，使同一水解反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)與此同時(shí)適用嬰幼兒配方奶粉和獨(dú)特醫(yī)藥學(xué)秘方嬰幼兒配方食品類（乳蛋白一部分水解反應(yīng)秘方、乳蛋白深度水解秘方和碳水化合物秘方）中谷氨酸成分的精確測(cè)量。

1原材料與方式

1.1 原材料與實(shí)驗(yàn)試劑

谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（C11H12N2O2，CAS號(hào)：73-22-3，純凈度：99.7%），法國(guó)Dr.Ehrenstorfer企業(yè)；α-羥基-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（C12H14N2O2，CAS號(hào)：110117-83-4，純凈度：98%），上海市甄準(zhǔn)生物技術(shù)有限責(zé)任公司；工業(yè)甲醇(色譜純)，英國(guó)Merck企業(yè)；醋酸銨（色譜純），英國(guó)Fisher Chemical企業(yè)；甲酸（色譜純），F(xiàn)isher Chemical企業(yè)色；氫氧化鋰（分析純），國(guó)藥控股化學(xué)藥品有限責(zé)任公司；硫酸（分析純），國(guó)藥控股化學(xué)藥品有限責(zé)任公司；聚四氟乙烯材料水解反應(yīng)管，帶外螺紋口外蓋，里襯聚四氟乙烯密封墊片；水相微孔濾膜（0.22 μm，上海安譜）；NIST秘方奶粉質(zhì)量控制樣1849a（（184±10）mg/100g, k=2）、NIST秘方奶粉質(zhì)量控制樣1869（（228±24）mg/100g, k=2）、嬰幼兒配方奶粉和獨(dú)特醫(yī)藥學(xué)秘方嬰兒食品（乳蛋白一部分水解反應(yīng)秘方、乳蛋白深度水解秘方和碳水化合物秘方），均為市面上。試驗(yàn)室自來(lái)水合乎 GB /T 6682 要求的一級(jí)水規(guī)定。

1.2標(biāo)液配置

谷氨酸標(biāo)液（100 μg/mL）：精確稱量10.0 mg谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自來(lái)水融解后滴定劑至100 mL；內(nèi)標(biāo)切削液（1 mg/mL）：稱量10 mg α-羥基-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自來(lái)水融解后滴定劑至10 mL。

1.3儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備

Thermo Ultimate 3000高效率液相色譜裝有瑩光探測(cè)器，英國(guó)Thermo Fisher企業(yè)；KQ-800DE超聲清洗儀，寧波新芝生物技術(shù)股權(quán)有限責(zé)任公司；MS204TS電子分析天平，法國(guó)梅特勒企業(yè)；DHG-9243BS-Ⅲ電熱干燥箱，上海市幼芽醫(yī)療機(jī)械生產(chǎn)制造有限責(zé)任公司；MS 3 basic渦流切換閥，法國(guó)IKA企業(yè)；IQ 7000超純水儀；英國(guó) Millipore 企業(yè)。

1.4試品前解決

精確稱量混和均衡的液體試件200 mg（精準(zhǔn)到1 mg）于裝有密封墊片的具塞外螺紋口聚四氟乙烯離心管架中，先后添加0.5 mL內(nèi)標(biāo)切削液、5 mL氫氧化鋰水溶液（4 mol/L），渦流攪拌后于超音波震蕩器中波動(dòng)5 min，確保試品充分分解后，放置110 ℃烘干箱中水解反應(yīng)20 h。取下水解反應(yīng)管，待制冷至常溫后，用鹽酸溶液（4 mol/L）調(diào)pH值至3~8，將水解反應(yīng)液所有遷移至50 mL容量瓶中并自來(lái)水滴定劑，攪拌后經(jīng)0.22 μm水相微孔濾膜過(guò)慮預(yù)留。

1.5儀器設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)

離子交換柱：Xbridge C18(3.5 μm, 150 mm×4.6 mm)；流動(dòng)性相：A為乙酸銨水溶液（10 mmol/L，pH =4.0），B為工業(yè)甲醇，梯度方向過(guò)柱，過(guò)柱程序流程見表1；柱溫：35 ℃；氣相容積：5 μL；瑩光探測(cè)器激起光波長(zhǎng)280 nm，發(fā)送光波長(zhǎng)346 nm。梯度方向過(guò)柱程序流程見表1，每一次氣相前原始流動(dòng)性相占比均衡5 min。