薇菜做為服用蔬菜水果已經(jīng)有悠久的歷史，以往在荒年是救雜草，已經(jīng)踏入高檔餐桌，其經(jīng)濟收益為一般蔬菜水果的4～5倍。天然的薇菜細嫩味美，營養(yǎng)豐富，未進行的葉子尤其佳品。薇菜既可生鮮，又可腌制、制干，是向日本出入口的大宗商品土特產(chǎn)山野菜。清煮薇菜中具體帶有添加劑和甜味素，因為日本的規(guī)范苛刻，因而檢驗出入口食品類中的食用添加劑成分做到規(guī)范，針對中國食用添加劑成分的檢查也是一種確保。

在我國規(guī)范檢驗辦法有很多，如滴定法、酶活性測定、薄層色譜法、氣相色譜分析等，但全是對試品各自解決開展不一樣辦法的測量，沒有與此同時監(jiān)測的方式 。如今相對性優(yōu)秀的檢測中心都是在科學(xué)研究這5種食用添加劑與此同時監(jiān)測的方式 ，對于于差異的栽培基質(zhì)應(yīng)用不一樣方式，現(xiàn)階段依照檢驗試品的差異大概能夠分成肉類食品、健康飲品、奶制品、含油率高的栽培基質(zhì)和一般栽培基質(zhì)等檢驗方式。在中國國家標準中，最開始發(fā)生針對食用添加劑檢驗的是在2003年，那時候的檢驗對于于獨立的添加物且方式比較落伍。此方法選用一種簡易的前解決方式，應(yīng)用的試品為清煮薇菜，栽培基質(zhì)簡易容易得到，用高效液相色譜色譜法對5種添加物與此同時氣相，一次檢驗獲得多種多樣結(jié)果，大大的減少了人力資源、物力資源和時間，結(jié)果精確靠譜。

一、原材料與方式

1、原材料與實驗試劑

工業(yè)甲醇（色譜純）：FisherScientific公司；乙酸銨（分析純）、稱量1.54g乙酸銨放水融解并稀釋液至1000mL，靜放，過0.45μm直徑濾紙，硫酸（分析純）：量取100mL硫酸，與100mL水完全混和，靜放）；氫氧化鈉、醫(yī)用乙醚（分析純）：天津科密歐化學(xué)藥品有限責(zé)任公司；試驗自來水為名創(chuàng)優(yōu)品純凈水

2、儀器設(shè)備與機器設(shè)備

LX—130離心脫水機（溫度控制）日本TOMY企業(yè)；UW402S電子分析天平，梅特勒一托利多有限責(zé)任公司；UMV一2多管渦流切換閥，北京市優(yōu)晟協(xié)同高新科技有限責(zé)任公司；Agilent一1100高效率液相色譜，安捷倫公司；50mL離心管架、10mL容量瓶、移液器、一次性塑料吸管、pH試紙、0.5μm水溶性濾紙等。

3、試品前解決

大部分試品中出現(xiàn)很多大分子物質(zhì)，如蛋白、人體脂肪等，必須 應(yīng)用混凝劑開展清潔解決，如乙酸鋅、亞鐵氰化鉀等，但本試品不帶有以上大分子物質(zhì)，故不用開展凈化處理實際操作。

此方法為反說法，將要試品中的食用添加劑先正獲取到醫(yī)用乙醚層中，后自來水反獲取至隔水層中，定量分析檢驗隔水層中的食用添加劑。

將清煮薇菜經(jīng)粉碎處置后，稱量2.0g試品于50mL離心管架中，放水10mL和0.5mL硫酸（1 1）開展堿化解決。添加醫(yī)用乙醚8mL波動獲取2次（共16mL），合拼萃取液。將萃取液波動，離心式（4000r／nlin，5min），棄掉下一層隔水層，向萃取液中精確添加10.0mL水，加氫氧化鈉調(diào)整pH為7～8，波動離心式（4000r／min，5min），取下一層隔水層過0.45μm水溶性濾紙。

4、標準物質(zhì)配置

國家標準物質(zhì)純品溶液稀釋，配置成10mg／L濃度值的貯備液，將貯備液稀釋液成0.01，0.03，0.05，0.07，0.09，0.10rng／mL的標液，用以測量標曲。

5、離子交換柱標準

WatersSymmetryShieldC18（150mm×4.6mm，5μm）離子交換柱，流動性相為0.02mol／L乙酸銨一工業(yè)甲醇（100 5）緩沖液，檢驗光波長為220mm，紫外線探測器，柱溫25℃，流動速度1mL／min，進樣量10μL。

6、精準度測量

為確保實驗精準度，取6份試品各自序號1，2，3，4，5，6，各稱量2g于50mL離心管架中，添加10mL水和0.5mL硫酸（1 1）開展堿化解決。各自添加8mL醫(yī)用乙醚獲取2次（共16mL），合拼萃取液經(jīng)波動離心式（4000r／min）5min，棄去下一層隔水層，精確添加10.0mL水，用氫氧化鈉調(diào)整pH為7～8，波動離心式（4000r／rnjn，5min），取下一層隔水層過0.45μm水溶性濾紙。

7、精確度測量

為確保實驗方式獲取到的添加物成分的實效性，人為因素地為試品中加上定量分析國家標準物質(zhì)開展檢驗，根據(jù)利用率分辨樣本的檢驗效果是不是合理。很多研究證實，當(dāng)利用率在85％～110％中間時，結(jié)果靠譜。向試品中添加1mg／L的混標水溶液，與試品開展一樣的前解決流程，經(jīng)0.45μm濾紙過慮后入儀器檢測。

二、結(jié)果與剖析

1、標曲的創(chuàng)建

對混標稀釋液后濃度值為0.01，0.03，0.05，0.07，0.09，0.10mg／mL的規(guī)范系列產(chǎn)品水溶液開展測量，以濃度值為橫坐標軸，峰總面積為縱軸，制作標曲，各自獲得線性回歸方程，見表1。安賽蜜、糖精鈉、苯甲醛、山梨酸、脫氫乙酸鈉這5種添加物的出峰圖見圖1，依照出峰的時間分別是安賽蜜、糖精鈉、苯甲醛、山梨酸、脫氫乙酸鈉。

由表1得知，該混標水溶液出峰時間分散化，在方法檢出限濃度值范疇內(nèi)呈優(yōu)良線性相關(guān)。

由圖1得知，5種添加物出峰間隔時間顯著，且峰不會有重疊狀況，即假如試品中包含以上5種添加物，譜圖上會在對應(yīng)部位出峰。

2、試品測量

對清煮薇菜應(yīng)用反說法檢驗食用添加劑成分，其結(jié)果見表2，譜圖見圖2。

對比分析1和圖2能夠 看得出，圖2中的譜圖沒有在對應(yīng)部位出峰，因此清煮薇菜試品中不帶有安賽蜜、糖精鈉、苯甲醛、山梨酸、脫氫乙酸鈉這5種食用添加劑。

3、精準度實驗

為確保試品的精準度，各自對清煮薇菜開展6次平行面實驗，實驗結(jié)果見表3。
 

由表3得知，開展6次平行面實驗均無驗出添加物，很有可能的具體情況是帶有添加物，但成分小于方法檢出限造成 未驗出；另一種情形是均沒有添加物，故無驗出。以上2種狀況均做到規(guī)范，結(jié)果判斷為清煮薇菜不帶有安賽蜜、糖精鈉、苯甲醛、山梨酸、脫氫乙酸鈉5種添加物。

4、精確度實驗

為了更好地確保檢驗的精確度，開展回收利用實驗，標曲見圖3，結(jié)果見表4。

由圖3和表4得知，人為因素添加帶有混標底試品檢驗結(jié)果是帶有防腐劑的，且同一種方式回收利用獲得的添加物成分不一樣。利用率能夠 證實該方式獲得的結(jié)果可靠，由于在前處理中獲取獲得的添加物會出現(xiàn)一定程度上的損害；當(dāng)利用率小于100％時證實獲取不徹底或是有損害；當(dāng)利用率高過100％時，表明試品中另外也帶有該添加物。此方法的相關(guān)系數(shù)r均在0.999之上，利用率在89％之上，表明實驗結(jié)果靠譜。

5、結(jié)果測算

試品中山梨酸、苯甲醛、脫氫乙酸鈉、安賽蜜、糖精鈉的成分依照下式測算：

式中：X為試品中食用添加劑成分，mg／kg；A為氣相容積中食用添加劑的成分，mg；V為試件稀釋液容積，mL；m為試件品質(zhì)，g。

三、探討

實驗說明：對試品開展粉碎、萃取法后，應(yīng)用WatersSymmetryShieldC18（150mm×4.6mm，5μm）離子交換柱，流動性相為0.02mol／L乙酸銨一工業(yè)甲醇（100 5）緩沖液，檢驗光波長為220mm，紫外線探測器，柱溫25℃，流動速度1mL／min，進樣量10μL時，混標中安賽蜜、糖精鈉、山梨酸、苯甲醛、脫氫乙酸鈉的出峰時間各自為4.785，6.681，8.117，11.310，12.987min，試品中未驗出。不一樣利用率說明在實驗過程環(huán)節(jié)中，會出現(xiàn)不明原因的損害，可能是獲取時間不夠，可能是獲取實驗試劑也有待改進，也有可能是現(xiàn)場采樣不立即，造成 一部分添加物溶解。在國家標準中以清煮薇菜為例子，應(yīng)用反說法檢驗5種食用添加劑，方式簡單，能夠節(jié)省大量的人力資源、物力資源，節(jié)約成本和資源，加速工作效能。