2.4.4 線性相關(guān)調(diào)查

用70%工業(yè)甲醇對儲備液開展逐步稀釋液，獲得2.024、20.240、50.600、101.200、151.800μg/m L的系列產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)品水溶液，各自高精密汲取水溶液各10μL，引入色譜分析儀開展測量，以標(biāo)準(zhǔn)品的氣相濃度值為橫坐標(biāo)軸（X），峰總面積為縱軸（Y），開展回歸分析，得規(guī)范曲線方程為Y=35.919 X-4.386 4,r=1.000 0，結(jié)果顯示，MMQ在2.024～151.800μg/m L線性相關(guān)優(yōu)良。

2.4.5 定量限和檢出限

取標(biāo)準(zhǔn)品儲備水溶液，逐漸稀釋液，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)氣相，氣相量為10μL，頻率穩(wěn)定度（S/N）為10∶1，測出MMQ的定量限約為2.024μg/m L。頻率穩(wěn)定度（S/N）為3∶1時，MMQ的檢出限約為0.607μg/m L。

2.4.6 精度實驗

選擇高、中、低（101.200、50.600、20.240μg/m L)3個濃度值的標(biāo)準(zhǔn)品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)相同1 d內(nèi)持續(xù)氣相6次，測出MMQ峰總面積的RSD各自為0.73%、0.95%、1.37%。持續(xù)測量3 d，每日氣相1次，紀(jì)錄MMQ峰總面積，測出MMQ峰總面積的RSD各自為2.06%、1.61%、1.88%。數(shù)據(jù)顯示日內(nèi)、日間精度均低于3%。說明日內(nèi)、日間精度優(yōu)良，儀器設(shè)備平穩(wěn)。

2.4.7 可重復(fù)性實驗

取試品粉末狀0.25 g(S5），按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，平行面6份，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)氣相，氣相量為10μL，紀(jì)錄MMQ的峰總面積。選用外標(biāo)一點法測算MMQ的成分，試品中MMQ的物質(zhì)的量為5.28 mg/g,RSD為1.37%，說明此方式 可重復(fù)性好。

2.4.8 可靠性實驗

取試品粉末狀0.25 g(S5），按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)各自于0、1、2、4、8、12、24 h氣相，氣相量為10μL，數(shù)據(jù)顯示MMQ峰總面積的RSD為1.81%，說明供試品水溶液在24 h內(nèi)平穩(wěn)。

2.4.9 加樣利用率實驗

高精密稱量已經(jīng)知道成分的EGT粉末狀0.125 g(S5）高精密稱取，按已檢測的50%、100%、150%高精密添加標(biāo)準(zhǔn)品水溶液，按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)氣相，紀(jì)錄峰總面積，選用外標(biāo)一點法測算加樣利用率。結(jié)果MMQ的均值加樣利用率為101.5%,RSD為1.46%。

2.4.1 0 定量分析測量

取7批EGT試品，按“2.4.2”項下方式 制取供試品水溶液，按“2.4.1”項下色譜儀標(biāo)準(zhǔn)氣相，經(jīng)HPLC測量后，數(shù)據(jù)顯示7批EGT(S8、S9因數(shù)據(jù)采集時間較長時間，未測量）的質(zhì)量濃度范疇在0.13%～0.53%，見表1。

3 探討

3.1 指標(biāo)值成份的挑選

EGT為蒙古習(xí)用中藥材，現(xiàn)階段無相應(yīng)的質(zhì)量控制規(guī)范及其專屬性成份的科學(xué)研究，本分析根據(jù)MCI色譜儀、硅橡膠色譜儀、高效率液相色譜儀等分離出來方式，獲得專屬性成份，經(jīng)核磁共振評定為一種喹啉大環(huán)內(nèi)酯黃酮（MMQ）。本試驗將EGT與其他4種近源試品：大藍(lán)刺頭、硬葉藍(lán)刺頭、全緣藍(lán)刺頭和藍(lán)刺頭，開展薄層色譜和HPLC檢驗較為，數(shù)據(jù)顯示大藍(lán)刺頭、硬葉藍(lán)刺頭、全緣藍(lán)刺頭不帶有MMQ，在藍(lán)刺頭試品中雖帶有小量MMQ，但遠(yuǎn)小于其檢測站。因而MMQ做為砂藍(lán)刺頭中成分較高且專屬性極強的成份，創(chuàng)建因其為指標(biāo)值成份判定定量分析方式 ，有一定的合理性與應(yīng)用性，能夠能夠更好地點評EGT中藥材的品質(zhì)。

3.2 薄層色譜辨別

在層析辨別展開劑的調(diào)查中，發(fā)覺酸針對層析進行管理體系的干擾比較大，非酸管理體系下，色斑較少、分離度較弱。挑選了多種多樣鉻黑T，包含磷鉬酸、碘化鉍鉀、碘、10%鹽酸酒精等，著色實際效果均不佳，不著色或是著色失靈，最后列入以三氯甲烷-醋酸乙酯-工業(yè)甲醇-苯甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開劑，254 nm紫外線殺菌燈下檢查瑩光色斑就可以。較為了不一樣生產(chǎn)廠家的層析板：銀龍-HSGF254板、江海-HSGF254板、法國MNSGF板和法國MNHSGF板，所確立的層析方式 在以上幾類板中均能得到 有效的進行實際效果，在其中以法國MNHSGF板分離出來實際效果最好是。

3.3 指紋圖譜創(chuàng)建

中藥材色譜儀指紋圖譜可以比較全方位地體現(xiàn)中藥材的總體品質(zhì)。本研究創(chuàng)建指紋圖譜統(tǒng)計分析方法能非常好地將EGT與同為別的綠色植物相差別。相似性剖析點評中，S9（生產(chǎn)批號20120815）相似性僅為0.679，別的EGT試品相似性均高過0.9，這提醒EGT試品陳置過久也許會干擾其中藥材品質(zhì)。這一發(fā)覺為中藥批發(fā)市場中EGT中藥材期限操縱給出的數(shù)據(jù)參照。不一樣來源的9批試品指紋圖譜中的一共有峰在數(shù)量及其相對性保存期上保持一致，但各一共有峰相對性峰總面積有一定的差別，表明各批號中藥材中間的品質(zhì)存有差別，推斷有可能與藥材產(chǎn)地、生長發(fā)育期限、收獲期等原因相關(guān)。將EGT和別的種藍(lán)刺頭的指紋識別數(shù)據(jù)信息開展數(shù)據(jù)分析，主成分分析法和聚類結(jié)果一致，均能完成EGT與同為別的綠色植物（藍(lán)刺頭、全緣葉藍(lán)刺、硬葉藍(lán)刺頭和大藍(lán)刺頭）的差別。在PCA中，16批試品聚為2類別，S1～S9號試品為不一樣批號EGT,S10～16號試品為藍(lán)刺頭屬別的種試品，在其中S8和S9號試品為2012年搜集的試品，雖經(jīng)置放很多年，成份有一定的降低，但仍歸到EGT中。在聚類中，S8和S9號試品處在同一組中；S14和S15號試品為全緣藍(lán)刺頭也在同一組中，該結(jié)論與OPLS-DA結(jié)果一致。

3.4 成分測量

在創(chuàng)建MMQ的定性分析方式 試驗中，開展了獲取方式 （超聲波、加溫流回）、獲取有機溶劑（純工業(yè)甲醇、70%工業(yè)甲醇、50%工業(yè)甲醇）、獲取時間和獲取頻次的調(diào)查。最后確認(rèn)的獲取便捷使用簡易、省時，對砂藍(lán)刺頭中MMQ獲取率高。調(diào)查了乙腈-水、乙腈-冰醋酸銨緩存鹽溶液、工業(yè)甲醇-0.1%苯甲酸溶液、乙腈-0.1%苯甲酸溶液等流動性相管理體系對液相色譜儀分離出來實際效果的危害。最后確認(rèn)的含測方式 可重復(fù)性好，MMQ的分離度和成分測量RSD均合乎檢驗規(guī)定。此外，因為S8和S9中藥材收集時間太久，為了更好地不危害成分程度制訂的精確性，未對這2批中藥材開展成分測量。