8、響應(yīng)面提升試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果
(1)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)
依據(jù)Box-Behnken結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),開展四要素三水準(zhǔn)實(shí)驗(yàn),提升酶輔助超聲波獲取阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的提煉加工工藝標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。以黃酮類物質(zhì)獲取率是指標(biāo)值,根據(jù)Design-ExpertV8.05手機(jī)軟件對(duì)表中實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)開展多元線性回歸線性擬合,得到黃酮類物質(zhì)獲取率(Y)對(duì)酶加上量(A)、乙醇濃度(B)、獲取時(shí)間(C)和獲取溫度(D)四要素的二次多種重歸仿真模擬方程式為:Y=18.03-0.15A-0.55B-0.35C-0.12D 0.39AB-0.59A2-0.93B2-0.42C2-0.41D2。
0.43AC 0.018AD-0.42BC 0.012BD-0.072CD
對(duì)該模式開展方差分析,結(jié)果如表3所顯示,該回歸分析F值14.88,P<0.0001,方程式實(shí)體模型做到極明顯;決定系數(shù)R2=0.9320,校準(zhǔn)指數(shù)AdjR2=0.8639;失擬項(xiàng)超過0.05,失擬不明顯,表明線性回歸方程線性擬合情況優(yōu)良;變異系數(shù)C.V為1.63%,說明實(shí)體模型的再現(xiàn)性非常好,因而還可以使用該實(shí)體模型提升阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的酶輔助超聲波獲取加工工藝。由各要素A、B、C、D的F值(或P值)尺寸能夠得到各要素對(duì)黃酮類物質(zhì)得率危害尺寸次序?yàn)锽>C>A>D。B、C的P值均低于0.01,表明乙醇濃度和獲取時(shí)間對(duì)黃酮類獲取危害極明顯。AB、AC、BC的P值低于0.01,表明酶加上量和乙醇濃度、獲取時(shí)間,乙醇濃度和獲取時(shí)間之間有顯著的配對(duì)t檢驗(yàn);而AD、BD、CD的P值超過0.05,說明她們中間的功效對(duì)黃酮類物質(zhì)獲取率沒有顯著的危害。不一樣因素配對(duì)t檢驗(yàn)的響應(yīng)面分析圖見圖8。根據(jù)DesignExpert8.0.5手機(jī)軟件剖析得到阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)纖維素酶輔助超聲波獲取的最好工藝技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)為:酶加上量1.42%,乙醇濃度47.10%,獲取時(shí)間38.19min,獲取溫度39.28℃;在這里加工工藝標(biāo)準(zhǔn)下,阿爾泰金銀花基礎(chǔ)理論預(yù)測(cè)分析獲取率是18.16%。
(2)認(rèn)證實(shí)驗(yàn)
為檢測(cè)響應(yīng)面法提升后的加工工藝穩(wěn)定性,考慮到實(shí)驗(yàn)過程的可行性分析,融合單要素試驗(yàn)結(jié)果,將以上獲取加工工藝標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整為:酶加上量1.4%,乙醇濃度47.0%,獲取時(shí)間38.0min,獲取溫度39.0℃。在這里前提下,開展3組平行面實(shí)驗(yàn),所得的阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率平均值為18.02±0.24%,與標(biāo)準(zhǔn)偏差的相對(duì)偏差為0.8%,線性回歸方程估計(jì)值與真實(shí)值相符合,表明應(yīng)用響應(yīng)面法提升獲得的建模主要參數(shù)精確靠譜,能真正反應(yīng)各要素對(duì)阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率的危害。
三、探討
文中討論了纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和中性化胰蛋白酶對(duì)超聲波獲取阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的協(xié)助功效,結(jié)果發(fā)覺他們均能提升黃酮類物質(zhì)的獲取率,但比較之下,纖維素酶在水溶液pH=4時(shí)功效較大。在提煉全過程中,纖維素酶水解反應(yīng)可毀壞植物細(xì)胞的植物細(xì)胞,推動(dòng)了其胞內(nèi)所含黃酮類類物質(zhì)的很多外滲,再融合超聲波的功效,水溶液中化學(xué)物質(zhì)濃度值擴(kuò)大,獲取率獲得很大提升伴隨著料液比的擴(kuò)大,黃酮類物質(zhì)的獲取率也持續(xù)擴(kuò)大,在1:40之后,獲取率不會(huì)再提升,趨向輕緩。根據(jù)此,依據(jù)Box-Behnken結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),挑選對(duì)獲取率危害很大的要素:酶加上量、乙醇濃度、獲取時(shí)間和獲取溫度,開展四要素三水準(zhǔn)實(shí)驗(yàn),響應(yīng)面提升阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)的纖維素酶輔助超聲波獲取加工工藝,最好獲取加工工藝標(biāo)準(zhǔn)為:pH為4,料液比1:40,超聲波輸出功率90W,酶加上量1.4%,乙醇濃度47.0%,獲取時(shí)間38.0min,獲取溫度39.0℃,在這里加工工藝標(biāo)準(zhǔn)下阿爾泰金銀花黃酮類物質(zhì)獲取率可以達(dá)到18.0%之上,高過早期流回獲取加工工藝科學(xué)研究得到的獲取率17.05%;且該辦法簡(jiǎn)便高效率、低成本、便于實(shí)際操作??茖W(xué)研究結(jié)論能為阿爾泰金銀花以及黃酮類物質(zhì)的深層次開發(fā)設(shè)計(jì)給予科學(xué)論證。