以林芝市售新鮮黃牛黨、羊、土雞、尸骨雞、白條鴨和幼鴿為原材料,對其脊、胸、臀等位置肉中的左旋肉堿成分開展測量、剖析和較為。選用酶技術(shù)性測定方法得到左旋肉堿的濃度值,并依據(jù)標(biāo)曲方程計算出左旋肉堿成分。根據(jù)對黃牛黨、羊、土雞、尸骨雞、白條鴨和幼鴿的脊、胸、臀等位置中左旋肉堿測量值的剖析發(fā)覺,黃牛黨各位置肉中左旋肉堿的成分均為最大:脊肉174.54mg/kg;臀肉173.56mg/kg;肩肉167.34mg/kg;胸肉174.241mg/kg,明顯高過羊、土雞、尸骨雞、白條雞、幼鴿中各位置肉左旋肉堿的成分(P<0.05)。在其中,幼鴿脊肉中左旋肉堿成分明顯高過胸肉、臀肉;羊胸肉左旋肉堿成分明顯高過脊肉、肩肉、臀肉;黃牛黨、尸骨雞、土雞的各位置肉間無明顯差別(P<0.05)。黃牛肉左旋肉堿成分明顯高過別的種群,同一種群的脊肉和胸肉的肉堿成分較高。
肉堿有3種電子光學(xué)同分異構(gòu)體:左旋肉堿、右旋肉堿和消旋體肉堿。右旋肉堿和消旋體肉堿全是生物中沒有的生成化學(xué)物質(zhì),僅有左旋肉堿在生物身體具備生物活性。左旋肉堿(L-carnitine亦稱vitaminBT),有機化學(xué)名叫L-β甲基-γ-三甲胺丁酸,化學(xué)式為C7H15NO3,是一種促進人體脂肪轉(zhuǎn)換為動能的類碳水化合物,也是一種相對性相對分子質(zhì)量較小的類蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu),又稱之為肉毒堿,其具體來源是尖肉。推動脂質(zhì)新陳代謝是其具體作用,它是調(diào)整膜蛋白內(nèi)外?;鵆oA/CoA(輔酶A)的比例,將長鏈脂?;鶐У骄€粒體基質(zhì),與此同時將膜蛋白內(nèi)發(fā)生的挎包脂酰基輸出。欠缺左旋肉堿很有可能會發(fā)生易疲勞,肌肉僵硬,發(fā)慌等病癥,情況嚴(yán)重發(fā)生代謝紊亂,暈厥乃至身亡,這也是因為影響油酸新陳代謝而致使的動能生成不夠。肉堿在食品類、營養(yǎng)成分、精飼料及其生物醫(yī)藥等各個領(lǐng)域運用普遍,且應(yīng)用前景較寬闊。肉堿現(xiàn)階段僅有法國、日本、西班牙等極少數(shù)我國能生產(chǎn)制造,中國對該商品科研開發(fā)設(shè)計相對性很少。
小動物全身肌肉具備肉質(zhì)地鮮嫩、口味潤化和肉味濃醇等特性,其脊肉、胸肉、臀肉、肩肉等機構(gòu)中左旋肉堿活力成份成分相對豐富多彩,具備一定的分析和探討使用價值。黃牛黨副產(chǎn)品的產(chǎn)銷量伴隨著在我國各個地域牛羊肉飲食業(yè)的迅速進步而日趨提升,而其做為純天然左旋肉堿的主要來源于便造成愈來愈多的人關(guān)心?,F(xiàn)階段,世界各國對小動物全身肌肉中左旋肉堿的獲取關(guān)鍵運用超音波輔助高氯酸法,在這個基礎(chǔ)上選用酶法測量全身肌肉中左旋肉堿的成分能夠不錯防止右旋肉堿和消旋體肉堿的造成,獲得天然的左旋肉堿產(chǎn)品科學(xué)研究相對性較為全方位。離子色譜法、高效率液相色譜儀質(zhì)譜分析聯(lián)使用方法等是左旋肉堿的測量關(guān)鍵采取的方式 ,而酶法是近些年快速發(fā)展起來比較靠譜的方式 ,運用酶法測量左旋肉堿的分析還不怎么見報導(dǎo)。酶法中肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶專一地功能于左旋肉堿和乙酰輔酶A中間的反映,從而轉(zhuǎn)化成乙酰肉堿和分散的輔酶。
新鮮土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊等小動物身體上的結(jié)構(gòu)為原材料,討論了不一樣機構(gòu)中左旋肉堿的成分。根據(jù)酶技術(shù)性測定方法獲得左旋肉堿的濃度值,依據(jù)標(biāo)曲線性回歸方程測算左旋肉堿成分。為幼鴿、土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊的脊肉、胸肉、臀肉等中的左旋肉堿成分測量給予理論來源。酶法測量全身肌肉中左旋肉堿成分較迅速簡易,所得的結(jié)果較精確靈巧,能夠更好地為合理運用小動物全身肌肉豐富多彩的左旋肉堿資源和加大力度開發(fā)設(shè)計高效益減肥食物給予一系列科學(xué)研究手冊。
1原材料
1.1實驗原料
實驗原材料:黃牛肩肉、黃牛胸肉、黃牛黨臀肉、黃牛脊肉、羊肩肉、羊胸肉、羊臀肉、羊脊肉、土雞胸肉、土雞臀肉、土雞脊肉、尸骨雞脯肉、尸骨雞臀肉、尸骨雞脊肉、京東白條鴨胸肉、白條鴨臀肉、白條鴨脊肉、幼鴿胸肉、幼鴿臀肉、幼鴿脊肉
原材料來源于:林芝市農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場
1.2實驗實驗試劑
1.3儀器設(shè)備與機器設(shè)備
2方式
2.1試驗設(shè)計
將5,5'二硫代雙-(2-氟苯苯甲醛)和分散的輔酶A反映造成淡黃色的化學(xué)物質(zhì),該化學(xué)物質(zhì)色調(diào)的深度與分散的輔酶A的成分成正比例關(guān)系。因為左旋肉堿和分散的輔酶A是等克分子反映關(guān)聯(lián),就可以間接性得到試件中左旋肉堿的成分。簡單點來說,便是使用酶技術(shù)性測定方法精確測量試品的OD值值,再依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程曲線圖測算出試品中堿成分。
2.2統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
每一次實驗做3組平行面實驗,數(shù)據(jù)信息用SPSS18.0手機軟件開展單要素方差分析,差別顯著者用Duncan’s開展多重比較。結(jié)果用“均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差”表明,明顯水準(zhǔn)設(shè)定為(P<0.05)。
2.3實驗方式
2.3.1實驗操作流程
試品測量前解決:將新鮮土雞、尸骨雞、白條鴨、幼鴿、黃牛和羊的胸肉、脊肉、臀肉等位置肉去除人體脂肪、筋腱、筋等,經(jīng)組織搗碎機搗爛后,各自稱量2g試品放置A(脊肉)、B(胸肉)、C(臀肉)等離心管架中,向每一個離心管架中添加10mL3%摩爾分?jǐn)?shù)的高氯酸(3mL100%的高氯酸加超純水系統(tǒng)稀釋液,滴定劑至100mL;先后將離心管架放到小型漩渦混和儀上勻漿5min;再將離心管架放到配有適度的水的量杯內(nèi),把量杯放進數(shù)控機床加溫超聲波清洗機內(nèi)超音波破壁料理機解決10min;后將離心管架放進0℃冰水混合物內(nèi)30min,最終將解決液放置低速檔臺式離心機解決10min留意配平),取上清液。加8mL3%高氯酸于沉積中,勻漿5min,超音波解決10min后,再離心式10min,一樣于0℃下靜放30min,取上清液。合拼2次上清液,用NaOH(稱量2gNaOH加超純水系統(tǒng)融解,滴定劑至100mL,濃度值為0.5mol/L)調(diào)上清液pH至7.8。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液至1mL上下。用一次性針筒提取上清液過0.45um直徑的濾紙,滴定劑至5mL。
2.3.2標(biāo)曲制作及全身肌肉左旋肉堿提獲得率測量
向各小試管嬰兒里各自添加0.4mmol/LDTNB,取其中2mL,用另一容量瓶滴定劑至50mL(遮光儲存)、1.33mmol/LEDTANa2,及其pH為7.5的266.7mmol/LTris-HCl緩沖溶液,滴定劑至50mL,再移取180µL的混和水溶液。左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配備成10mg/L,20mg/L,30mg/L,40mg/L,50mg/L,60mg/L,70mg/L,80mg/L不一樣濃度值水溶液,各自取60µL引入混和水溶液,并稀釋液至2.5mL。再快速添加5μL0.55mmol/L肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶水溶液,于37℃自然環(huán)境反映16min后,放置96孔板中,于酶標(biāo)儀內(nèi)412nm處測量其左旋肉堿的OD值。
左旋肉堿的提獲得率(mg/kg)=cv/100m
式中:C為依據(jù)標(biāo)曲得到萃取液中左旋肉堿的濃度值,mg/L;V為萃取液滴定劑后的容積,mL;m為牛羊肉的品質(zhì),g