1963年，俞?；莸劝l(fā)覺(jué)二氫查爾酮以及化合物可做為甜味素，并從柑桔黃烷酮中獲取了柚皮苷二氫查爾酮（NariNgiNDC）等。二氫查爾酮的清甜味延遲時(shí)間長(zhǎng)，口味清新，糖度高，發(fā)熱量低，安全性無(wú)毒性，能合理的屏蔽掉苦澀味。二氫查爾酮類物質(zhì)對(duì)糖尿病患者有一定功效。除此之外，二氫查爾酮類物質(zhì)具備藥力官能團(tuán)-2，6-二甲基苯乙酮構(gòu)造，該官能團(tuán)有清除自由基功效，根據(jù)清除氯丁二烯、消除羥氧自由基來(lái)完成。皇甫文凱以柚皮渣為原材料，超音波協(xié)助獲取柚皮苷，并且用D101大孔樹(shù)脂分離出來(lái)聚集，獲得含量為83.7%的柚皮苷；對(duì)柚皮苷在偏堿情況下充壓并以鈀碳做為金屬催化劑生成柚皮苷二氫查爾酮（NariNgiNDC），產(chǎn)出率為85.2%。參考文獻(xiàn)和以超音波輔助酒精獲取香柚皮中的柚皮苷，并且用弱正負(fù)極AB-8環(huán)氧樹(shù)脂分離純化柚皮苷，NaOH做為過(guò)柱劑，獲得含量為77.26%的柚皮苷堿溶液，最終將該燒堿溶液在金屬催化劑雷尼鎳的效果下，加氫裂化生成NariNgiNDC。李晚誼等研究表明云南省甜茶很強(qiáng)的皮膚過(guò)敏功效，其抗敏功能的成分是二氫查爾酮-4’-β-D葡萄糖水苷和二氫查爾酮-2’-β-D葡萄糖水苷。方旭兵等研究表明龍血樹(shù)醇提取液龍血竭的主要成分——龍血素A跟龍血素B均為二氫查爾酮類物質(zhì)，經(jīng)對(duì)有關(guān)二氫查爾酮生成和裝飾及其用HepG2體細(xì)胞開(kāi)展抗晚期肝癌惡性腫瘤活力挑選，發(fā)覺(jué)二氫查爾酮類物質(zhì)中F-18和F-16抗晚期肝癌惡性腫瘤活力不錯(cuò)。楊美琪研究表明運(yùn)用硅橡膠、大孔樹(shù)脂、MCi-CHP20P及聚糖疑膠柱等分離出來(lái)方式，融合薄層色譜及HPLC剖析木棗棗根醇提物，獲得成分較高的二氫查爾酮-4’-β-D-吡喃葡萄糖水苷等16個(gè)化學(xué)物質(zhì)。現(xiàn)階段，NariNgiNDC的活力科學(xué)研究報(bào)導(dǎo)較少，本分析對(duì)其抗氧化性活力和美白皮膚活力開(kāi)展基本討論。

1原材料與方式

1.1原材料、實(shí)驗(yàn)試劑與機(jī)器設(shè)備

柚皮苷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，上海源葉；NariNgiNDC標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，上海源葉；新橙皮苷二氫查爾酮標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，上海源葉；ABTs，碧云天生物；酪氨酸酶，上海源葉；其他實(shí)驗(yàn)試劑均為分析純；AuToｄoCkviNa1.1.2，英國(guó)sCripps研究室。EL204-iC電子分析天平，英國(guó)METTLERTOLEDO企業(yè)；5ML移液器，英國(guó)EppeNｄorF企業(yè)；syNergyTX多用途酶標(biāo)儀，英國(guó)伯騰儀器設(shè)備有限責(zé)任公司；MuLTiskaNGo全光波長(zhǎng)讀值儀，英國(guó)TherMosCieNTiFiC企業(yè)。

1.2實(shí)驗(yàn)方式

1.2.1ABTs氧自由基消除工作能力測(cè)量

根據(jù)3.0Mg/ML柚皮苷、1.0Mg/MLNariNgiNDC、0.30Mg/MLNHDC、0.0025Mg/ML原兒茶醛與ABTs自由基反應(yīng)，測(cè)量其吸光度值，制作TroLox（0.15，0.30，0.60，0.90，1.20，1.50MMoL/L）標(biāo)曲，測(cè)算其與TroLox的同樣消除工作能力時(shí)的使用量。實(shí)際操作流程：

1）在96孔板的每一個(gè)檢驗(yàn)孔內(nèi)添加200μLABTs切削液。

2）空白試驗(yàn)孔內(nèi)添加10μL純凈水或PBs等適度水溶液，標(biāo)曲檢驗(yàn)孔壁添加10μL各種各樣含量的TroLox標(biāo)液，試品檢驗(yàn)孔壁添加10μL試品，輕輕地?cái)嚢琛?/p>

3）室內(nèi)溫度孵育2～6MiN，于光波長(zhǎng)734NM處測(cè)量OD值。

4）依據(jù)標(biāo)曲測(cè)算試品的總抗氧化能力，用TroLox等效電路抗氧化能力（TroLoxEquivaLeNTANTioxiｄaNCapaCiLy，TEAC）來(lái)表明。

1.2.2羥氧自由基消除工作能力測(cè)量

根據(jù)3.0Mg/ML柚皮苷、1.0Mg/MLNariNgiNDC、0.50Mg/MLNHDC、0.15Mg/ML原兒茶醛與羥自由基反應(yīng)，測(cè)量其吸光度值，制作TroLox（0.01，0.025，0.05，0.10，0.15Mg/L）標(biāo)曲，測(cè)算其與TroLox的劑量，從而較為抗氧化能力強(qiáng)、弱。

依照表1列出次序向酶標(biāo)板中添加相匹配實(shí)驗(yàn)試劑，按表1要求的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)際操作，以TroLox為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制作標(biāo)曲。

試品的抗氧化能力依據(jù)式（1）開(kāi)展測(cè)算?？寡趸芰χ狄訲roLox同樣抗氧化能力時(shí)的使用量（μMoLTroLox摩爾質(zhì)量/g）表明，即1g試品等同于TroLox的μMoL數(shù)。

式中，A_試品—試品OD值；A_空缺—試品空缺O(jiān)D值；A_TroLox—TroLox水溶液OD值；M_TroLox—TroLox水溶液的摩爾質(zhì)量（μMoL）；M_試品—試品的品質(zhì)（Mg）。

FerriC-TPTZ切削液[300MMoL/L醋酸鹽緩沖溶液（0.31g三水合乙酸鈉 1.6ML醋酸 超純水系統(tǒng)至100ML，pH3.6]、10MMoL/LTPTZ的40MMoL/鹽酸溶液和20MMoL/LFeCL₃·6H₂O水溶液，以容積比10∶1∶1混和），室內(nèi)溫度反映30MiN后，于光波長(zhǎng)593NM處用酶標(biāo)儀測(cè)量其OD值。吸光度值的尺寸與試品的抗氧化能力正相關(guān)。維他命C的標(biāo)曲配置含量為：25，50，100，200，400，800μMoL/L，測(cè)量結(jié)果以維他命C為參照規(guī)范，結(jié)果表明為μMoLAAE/g體力勞動(dòng)。平行測(cè)定3次，結(jié)果取均值測(cè)算。

1.2.4 ORAC測(cè)定方法試品的自由基消除工作能力

根據(jù)3.00g/L柚皮苷、1.00g/LNariNgiNDC、3.00g/LNHDC、0.0125Mg/ML原兒茶醛與過(guò)氧化物自由基反應(yīng)，測(cè)量其吸光度值，制作TroLox（62.5，125，250，500，500，1000MoL/L）標(biāo)曲，測(cè)算其與TroLox的摩爾質(zhì)量，較為抗氧化能力強(qiáng)、弱。

該辦法以甲酰胺類物質(zhì)AAPH做為過(guò)自由基來(lái)源于，熒光素鈉鹽為瑩光顯色劑。將熒光素鈉鹽、AAPH和水溶維他命C類似物TroLox各自用磷酸緩沖溶液（pH7.0）融解，在96孔板中先后添加25μL各含量的TroLox標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水溶液和試品及其200μL瑩光光素醋酸鹽水溶液（8.68NMoL/L），隨后，將填料放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀中，用GeNe5程序編程實(shí)際操作，37℃加熱30MiN，快速添加AAPH水溶液25μL（153MMoL/L），全自動(dòng)震蕩混勻，在激起光波長(zhǎng)485NM，發(fā)送光波長(zhǎng)528NM處用熒光酶標(biāo)儀測(cè)量。原始吸光度抗壓強(qiáng)度值記作f₀，之后每過(guò)1MiN測(cè)量一個(gè)點(diǎn)，共測(cè)量120MiN，瑩光抗壓強(qiáng)度各自記作f₀，f₁，f₂…f₁₂₀，依據(jù)公式計(jì)算（2）統(tǒng)計(jì)分析各含量的曲線圖下總面積AUC值。ORAC的含水量越高，抗氧化能力越強(qiáng)。

TroLox標(biāo)曲配置濃度值分別為62.5，125，250，500，1000μMoL/L，測(cè)量結(jié)果以TroLox為參照規(guī)范，結(jié)果表明為μMoLTroLox（TE）/g體力勞動(dòng)。平行測(cè)定3次，結(jié)果取均值測(cè)算。

1.2.5 NariNgiNDC和人銅鋅超氧化物歧化酶sOD的分子對(duì)接

選用CheMBioDrawULTra14.0繪制化學(xué)物質(zhì)原兒茶醛和NariNgiNDC的構(gòu)造，隨后用CheMBio3DULTra14.0轉(zhuǎn)換為三維構(gòu)造，并且用sybyL手機(jī)軟件的MMFF94引力場(chǎng)開(kāi)展提升。人銅鋅超氧化物歧化酶sOD的三維構(gòu)造（PDBiD：3RE0）從RCsB蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)下載。銅鋅超氧化物歧化酶和化學(xué)物質(zhì)均應(yīng)用AuToｄoCkTooLs1.5.6轉(zhuǎn)換為PDBQT文件格式。選用AuToｄoCkviNa1.1.2開(kāi)展分子對(duì)接。銅鋅超氧化物歧化酶活力結(jié)構(gòu)域的座標(biāo)設(shè)定為：size_x=15，size_y=15，size_z=15；CeNTer_x=1.346，CeNTer_y=-3.077，CeNTer_z=30.419。為了更好地提升測(cè)算的精確度，將主要參數(shù)exhausTiveNess設(shè)定為20。除開(kāi)尤其表明，其他參數(shù)均選用初始值。最終，選擇打得分最大的構(gòu)像用PyMoL1.7.6開(kāi)展結(jié)果剖析。1.2.6酪氨酸酶活力抑止實(shí)驗(yàn)根據(jù)熊果素（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、柚皮苷（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、NariNgiNDC（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）、NHDC（0.625，1.25，2.5，5，10Mg/ML）與酪氨酸酶反映測(cè)量其吸光度值并制作曲線圖，算出iC50值，從而較為抗氧化能力強(qiáng)、弱。