金銀花茶來自忍冬科綠色植物忍冬LonicerajaponicaThumb.的干躁花骨朵或帶初開的花,具備清熱去火,消防疏散風(fēng)寒風(fēng)熱的作用。各代對金銀花茶的泡制方式具體有炒黃、炒炭、蜜炙等?!吨袊幍洹?015年版僅載于了金銀花茶,但山東省、天津市、上海市、安徽省、江西省、廣東省、廣西省等省份中藥炮制標(biāo)準(zhǔn)均載于了金銀花茶炭。金銀花茶炒炭后寒涼變?nèi)?,并具備澀性和止痛功效,善清解下焦及血分之濕毒?/p>
當(dāng)代研究表明,金銀花茶關(guān)鍵帶有有機(jī)物類、黃酮類化合物、多糖類等各種活力成份,有機(jī)物類成份具體有綠原酸、異綠原酸、咖啡酸等,黃酮類化合物、多糖類成份具體有原兒茶醛、原兒茶醛-3-O-β-D-葡萄糖水苷、金絲桃苷、木犀草素等。綠原酸具備抑菌、退熱、抗感染功效,咖啡酸具備抗感染、止血方法功效,原兒茶醛可減少小白鼠出凝血時間,木犀草素具備抗感染、止血方法功效。金銀花茶炒炭后綠原酸成分顯著降低,咖啡酸、原兒茶醛、木犀草素3種止血方法成份的成分明顯提升。金銀花茶炭品混懸液、水煎液較其生品止血方法功效更明顯,臨床醫(yī)學(xué)多用以醫(yī)治每科滲出性病癥。但當(dāng)前對金銀花茶炭止血方法功效的科學(xué)研究,多以一切正常小動物或體外實驗為主導(dǎo),止血方法體制尚不清楚。本試驗參考參考文獻(xiàn),從血熱出血實體模型大白鼠的一般臨床癥狀轉(zhuǎn)變、人體體溫更改、凝血指標(biāo)值及其胃潰瘍出血和損害狀況等層面,科學(xué)研究金銀花茶炒炭前后左右散血止血方法功效轉(zhuǎn)變。
1儀器設(shè)備與原材料
1.1儀器設(shè)備
AYW8000全自動凝血功能檢測儀(南京市瑞麥科技發(fā)展有限責(zé)任公司);H3-18KR型超低溫冷凍離心機(jī)(湖南省可成實驗儀器有限責(zé)任公司);MK-30型電加熱溫度控制炒藥機(jī)(江陰市祝塘明科鑄造廠);FA2004型電子分析天平(十萬分之一,上海市上平儀器設(shè)備有限責(zé)任公司);D4-6050型真空干燥箱(佛山市予華儀器設(shè)備有限責(zé)任公司企業(yè))。
1.2藥物與實驗試劑
金銀花茶購自山東省德鄰嘉盛中藥制劑有限責(zé)任公司,經(jīng)山東省中國醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研組劉浩專家教授評定為忍冬科綠色植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干躁花骨朵。金銀花茶炭:按研究組早期甄選出的炒炭加工工藝制取。取凈金銀花茶,置電加熱溫度控制炒藥機(jī)內(nèi)(設(shè)置炮制溫度為250℃,炮制4min,炒藥機(jī)轉(zhuǎn)速比為40r/min),制成品表層焦深褐色,具焦香味,得率80.78%。
云南白藥(云南白藥控股集團(tuán)有限責(zé)任公司,生產(chǎn)批號Z53020798);酵母粉(安琪酵母股權(quán)有限責(zé)任公司),羧甲基甲基纖維素鈉(CMC-Na,國藥控股化學(xué)藥品有限責(zé)任公司,生產(chǎn)批號F20170614);枸櫞酸鈉(天國藥控股化學(xué)藥品,生產(chǎn)批號20170327);其他化學(xué)藥品均為分析純。檢測試劑盒:凝血酶時間(PT,生產(chǎn)批號20171030)、凝血酶時間(TT,生產(chǎn)批號20171030)、活性部份凝血酶活酶時間(APTT,生產(chǎn)批號20171030),均采購于南京建成生物技術(shù)研究室;其他實驗試劑均為分析純。
1.3小動物
SD男性大白鼠,休重180~220g,購于濟(jì)南市朋悅動物實驗繁殖有限責(zé)任公司,小動物喂養(yǎng)許可證編號:SCXK(魯)20140007。
2方式
2.1供標(biāo)準(zhǔn)溶液的制取
2.1.1大鼠灌胃液的制取
稱量金銀花茶炭細(xì)粉300g、金銀花茶細(xì)粉368.41g(按得率測算,等同于炒金銀花茶炭300g),加10倍量侵泡30min,流回獲取30min,濾過;殘渣加上8倍量50%酒精流回獲取30min,濾過;殘渣再加酒精流回獲取30min,濾過;合拼3次滲瀝液,緩解壓力濃縮成中藥浸膏。取中藥浸膏,添加0.5%CMC-Na水溶液超聲波融解,做成濃度值為0.60g/mL的大鼠灌胃液。
2.1.2酵母粉混懸液的制取
取酵母粉20g,加純凈水,碾磨勻稱,滴定劑至100mL容量瓶中,做成濃度值為20%的酵母菌混懸液,在用現(xiàn)配。
2.1.3云南白藥混懸液的制取
高精密稱量云南白藥粉末狀6.25g,碾磨勻稱,添加0.5%CMC-Na水溶液配置成0.025g/mL的云南白藥混懸液。
2.2分組、造模及給藥
取SD男性大白鼠,放置溫度為18~25℃、空氣濕度為45%~75%的小動物喂養(yǎng)房自然環(huán)境中適應(yīng)能力5天。排序前去除不人體正常體溫(低于36.5℃或超過38.5℃)或持續(xù)2次測體溫波動大于0.5℃的大白鼠,隨后任意分成5組,各自為空缺組、實體模型組、云南白藥組、金銀花茶組、金銀花茶炭組,每一組10只??杖苯M隨意飲用水,其他每組以5%酒精替代隨意飲用水,持續(xù)7天。第8天逐漸灌胃,給藥組各自灌胃給與金銀花茶生品與炭品灌胃酸,空缺組和實體模型組灌胃給與等大小的0.5%CMC-Na水溶液,云南白藥組灌胃給與云南白藥混懸液(給藥使用量見表1),每日2次,持續(xù)給藥7天,于第一三天,空白試驗組于后背兩邊皮內(nèi)注射相等鹽水,其他每組于后背兩邊皮內(nèi)注射20%的酵母粉混懸液,注射液量為10mL/kg。
2.3一般臨床癥狀觀查
2.3.1大白鼠休重年增長率測量
各自于試驗第7天和第14天,測量每組大白鼠的休重并測算每組休重年增長率。
休重年增長率(%)=(第14天休重-第7天休重)/第7天休重×100%
2.3.2大白鼠飲食搭配量、每天喝水量測量
試驗第一三天,大白鼠皮內(nèi)注射20%的酵母粉混懸液后,將每組大白鼠的飲食搭配量、每天喝水量開展48h檢驗,并測算每組大白鼠每100g休重的飲食搭配量和每天喝水量,取其均值。
2.3.3大白鼠排泄物水分含量測量
試驗第一三天,大白鼠皮內(nèi)注射20%的酵母粉混懸液2h后,對每組每只大白鼠取新鮮排泄物1粒,稱其濕重,置烘干箱105℃干躁5h后,制冷至恒重,稱其體力勞動,并測算排泄物水分含量,取其均值。
排泄物水分含量(%)=[(濕重-體力勞動)/濕重]×100%
2.3.4大白鼠肛溫測量
試驗第一三天,大白鼠皮內(nèi)注射20%的酵母粉混懸液后檢驗每組大白鼠的肛溫轉(zhuǎn)變,每過2h測1次,持續(xù)測量5次。
2.4大白鼠血夜內(nèi)外源凝血指標(biāo)值測量
試驗第14天,大鼠灌胃給藥1h后,將每組大白鼠用10%水合氯醛腹部注入麻醉劑,腹主動脈采血,3.8%枸櫞酸鈉1∶9(V∶V)抗凝,全血以3000r/min離心式10min,取血液,測量血液內(nèi)外源凝血指標(biāo)值(PT、APTT、TT)。PT、APTT、TT各指標(biāo)值依照檢測試劑盒的操作方法開展測量。
2.5大白鼠胃潰瘍出血及損害狀況觀查
試驗第14天,大白鼠采血后處決,破腹取胃機(jī)構(gòu),用鹽水清洗,浸于10%福爾馬林溶液水溶液中,人眼觀查胃粘膜流血及損害具體情況并照相。
2.6試驗信息的應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)解決
選用SPSS22.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析系統(tǒng)對試驗信息開展小組之間t檢驗及方差分析,試驗數(shù)據(jù)信息以x¯±s表明,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
3結(jié)果
3.1金銀花茶炒炭前后左右對血熱出血實體模型大白鼠休重年增長率、飲食搭配量、每天喝水量、排泄物水分含量的危害
實體模型組組與空白試驗組對比,大白鼠臨床癥狀發(fā)生了一系列轉(zhuǎn)變,包含體重下降,飲食搭配量少,每天喝水量提升,排泄物水分含量減少,大便的顏色較黑,且干結(jié)顆粒物縮小,精神面貌較活躍性,背毛變枯變黃,一部分大白鼠鼻腔及內(nèi)耳最深處有少量出血狀況。各給藥組與模式組較為,大白鼠休重、飲食搭配量均提升,每天喝水量降低,排泄物水分含量提升,排便稍軟,運動量相對性降低,背毛轉(zhuǎn)好,大白鼠鼻腔及內(nèi)耳最深處流血消退。紀(jì)錄并剖析每組大白鼠給藥后一般臨床癥狀轉(zhuǎn)變。結(jié)果見表1。
3.2金銀花茶炒炭前后左右對血熱出血實體模型大白鼠人體體溫的危害
大白鼠后背兩邊皮內(nèi)注射20%的酵母粉混懸液,并融合工業(yè)乙醇的有機(jī)化學(xué)刺激效果,可造成大白鼠肛溫在第2h后顯著上升,與空缺組對比,實體模型組大白鼠發(fā)燙全過程平穩(wěn),能8h保持高溫,表明熱證實體模型復(fù)制成功。與模式組對比,呈陽性組無顯著區(qū)別,說明云南白藥在大白鼠特異性免疫神經(jīng)中樞中不起緩沖作用;金銀花茶組和金銀花茶炭組均能明顯抑止酵母造成 的大白鼠體溫升高,但金銀花茶組好于金銀花茶炭組,說明金銀花茶生品的散血功效強(qiáng)過炭品。結(jié)果見表2。
4探討
中醫(yī)基礎(chǔ)理論覺得,心火旺妄行流血就是指熱邪入侵身體,致氣分熱、血分熱,心火旺則郁積、互搏,血盛則瘀,則流血,為臨床醫(yī)學(xué)常見病。本試驗選用5%酒精長期有機(jī)化學(xué)刺激性大白鼠胃,造成 大白鼠胃黏膜燒灼生產(chǎn)制造出胃潰瘍出血實體模型,并融合傳統(tǒng)式的皮內(nèi)注射酵母粉混懸液生產(chǎn)制造出血熱實體模型,可以防止選用酒精造模法而致大白鼠喝醉情況,而且造模期內(nèi)一直食用5%酒精,大白鼠身體對酒精有滿足的全過程,導(dǎo)致實體模型組大白鼠和空缺組大白鼠的身體新陳代謝成份有很大的差別,在這里一點上選用的血熱出血細(xì)胞模型更加有效。
本試驗選用酵母粉融合酒精創(chuàng)建大白鼠血熱出血實體模型,研究金銀花茶生、炭品對血熱出血實體模型大白鼠休重年增長率、飲食搭配量、每天喝水量、排泄物水分含量、肛溫、PT、APTT、TT以及胃機(jī)構(gòu)流血和傷害的危害。結(jié)果顯示,金銀花茶和金銀花茶炭均能明顯提升血熱出血實體模型大白鼠休重和飲食搭配量,減少實體模型大白鼠每天喝水量、排泄物水分含量和直腸溫度,具有人體體溫神經(jīng)中樞緩沖作用,在其中,以生金銀花茶減溫功效愈發(fā)明顯;金銀花茶炭可顯著減少血熱出血實體模型大白鼠PT、APTT及TT,改進(jìn)血熱出血實體模型大白鼠胃潰瘍出血和胃炎狀況,其功效明顯強(qiáng)過金銀花茶生品。本探討結(jié)果顯示,生金銀花茶散血功效較強(qiáng),止血方法功效較差,炒炭后散血功效變?nèi)酰寡椒üπ岣摺?/p>
PT體現(xiàn)外源凝血功能系統(tǒng)軟件,APTT體現(xiàn)內(nèi)源凝血功能系統(tǒng)軟件,TT體現(xiàn)纖維蛋白變化為游離脂肪酸、內(nèi)外源共通性凝血功能系統(tǒng)軟件是不是存有抗凝和纖溶亢進(jìn)。金銀花茶炭可顯著減少血熱出血實體模型大白鼠PT、APTT及TT,表明金銀花茶炭的止血方法體制可能是根據(jù)危害內(nèi)外源凝血功能系統(tǒng)軟件起功效的。