目地 調(diào)查雞血藤手鐲橫斷面環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)與其說中藥材質(zhì)量中間的關(guān)聯(lián)性。方式 醇可溶浸出物成分依照《中國(guó)藥典:一部》(2015年版)附則XA測(cè)定方法;選用高效液相色譜色譜分析測(cè)量原兒茶酸、兒茶酸、表兒茶素、芒柄花素及染料木素的成分及創(chuàng)建高效率液相色譜儀(HPLC)指紋圖譜,用SPSS對(duì)其環(huán)紋數(shù)與醇可溶浸出物及五個(gè)成分開展相關(guān)分析。結(jié)果 醇可溶浸出物的占比在3環(huán)上下時(shí)做到一個(gè)最高值,后伴隨著環(huán)紋數(shù)的提升,趨勢(shì)分析各有不同。不一樣環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)中藥材中原兒茶酸、兒茶酸及表兒茶素的成分差別很大,而芒柄花素與染料木素的成分差別較小,在其中兒茶酸與表兒茶素、芒柄花素與染料木素在不一樣環(huán)氧樹脂環(huán)紋中藥材中的動(dòng)態(tài)性趨勢(shì)分析比較一致;除1環(huán)試品外,同一主莖不一樣環(huán)紋數(shù)的中藥材試品具備較高的相似性;環(huán)紋數(shù)與醇可溶浸出物及五個(gè)成分中間無明顯關(guān)聯(lián)性。結(jié)果 各指標(biāo)性成份的成分與環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)中間沒有一定關(guān)聯(lián)性,雞血藤手鐲橫剖面的環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)的是多少不能做為評(píng)定中藥材品質(zhì)好壞的形象化根據(jù),但以3環(huán)之上當(dāng)藥為宜。
雞血藤手鐲為主導(dǎo)產(chǎn)自廣東省、廣西省、云南省等地的廣東嶺南特點(diǎn)中藥材,《中國(guó)藥典:一部》(2015年版)載于為豆類植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn.的干躁藤莖,具備補(bǔ)血補(bǔ)氣、活血化瘀、通脈之作用,用以醫(yī)治月經(jīng)失調(diào)、氣血兩虛臘黃、發(fā)麻偏癱、風(fēng)濕病痹痛等癥[1],為雞血藤片、金雞膠囊、婦科千金片、花紅片、正天丸等中藥方劑的方劑原材料,臨床醫(yī)學(xué)使用普遍,藥用價(jià)值需要量大。
雞血藤手鐲為多年生長(zhǎng)木制藤莖類中藥材,天然的物種關(guān)鍵分散于山坡地林中。伴隨著經(jīng)濟(jì)林木地的開發(fā)設(shè)計(jì),其生態(tài)系統(tǒng)生態(tài)環(huán)境保護(hù)遭到受到破壞,天然的物種遭受掠奪性采伐,物種修復(fù)與升級(jí)速率遲緩,再加上雞血藤手鐲需求量提升,中國(guó)天然的資源已達(dá)到不上服藥要求,產(chǎn)品中藥材多從越南地區(qū)、越南、越南等國(guó)進(jìn)口。因?yàn)樵a(chǎn)地生態(tài)環(huán)境保護(hù)及主莖生長(zhǎng)發(fā)育年數(shù)的不一樣,藤莖的不一樣位置大小不一,橫斷面的環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)及顏色差別很大,中藥材品質(zhì)良莠不齊。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《中國(guó)藥典》百度收錄的雞血藤手鐲中藥材特性評(píng)定項(xiàng)下沒有要求橫斷面的環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù),規(guī)定醇可溶浸物成分不可低于8%,傳統(tǒng)式當(dāng)藥習(xí)慣性以3環(huán)之上為宜。雞血藤手鐲橫斷面環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)能不能做為評(píng)定中藥材本質(zhì)質(zhì)量的特性指標(biāo)值,仍待進(jìn)一步科學(xué)研究。據(jù)成分及藥理學(xué)科學(xué)研究結(jié)果,專家學(xué)者們推斷黃酮類化合物、多糖類成份可能是雞血藤手鐲對(duì)血液系統(tǒng)功效及抗腫廇等活性部位[2,3,4]。雞血藤手鐲黃酮類物質(zhì)中的黃烷醇類成份,如兒茶酸和表兒茶素成分較高;大豆異黃酮類成份,如芒柄花素、染料木素等的成分較低[5,6,7,8]。因而本分析在醇可溶浸出物成分檢測(cè)的根基上,以黃酮類化合物、多糖類成分為監(jiān)測(cè)指標(biāo)值,進(jìn)行不一樣環(huán)氧樹脂環(huán)紋數(shù)雞血藤手鐲中藥材質(zhì)量的剖析與點(diǎn)評(píng),以求為雞血藤手鐲當(dāng)藥規(guī)范的特性評(píng)定給予科學(xué)論證。
1.1 儀器設(shè)備
Waters2695高效率液相色譜;Empower色譜儀工作平臺(tái)(英國(guó)Waters企業(yè));Waters XTerra C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);LC-20A型高效率液相色譜(日本安捷倫儀器企業(yè));A560型紫外線-能見光光度計(jì)(翱藝儀器設(shè)備有限責(zé)任公司);XR 205SM-DR型十萬分之一天平秤(法國(guó)Precisa企業(yè));BP-110S型萬分之一天平秤(法國(guó)Sartorius企業(yè));KQ3200E型超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器設(shè)備有限責(zé)任公司);SHZ-D(Ⅲ)冷卻循環(huán)水式機(jī)械泵(佛山市予華儀器設(shè)備有限責(zé)任公司企業(yè))。
1.2 試藥
工業(yè)乙醇、工業(yè)甲醇、乙酸丁酯等均為分析純,水為純凈水,乙腈、硫酸銨、冰醋酸等為色譜純。原兒茶酸(生產(chǎn)批號(hào):110809-200604)、兒茶酸(生產(chǎn)批號(hào):201102)、表兒茶素(生產(chǎn)批號(hào):110878-200102)、芒柄花素(生產(chǎn)批號(hào):111703-200501)、染料木素(生產(chǎn)批號(hào):111704-200501)、黃豆苷元(生產(chǎn)批號(hào):20120426)、毛蕊大豆異黃酮(生產(chǎn)批號(hào):100618),均供成分檢測(cè)用,中國(guó)藥品生物制藥計(jì)量檢定研究所;異甘草素(純凈度≥98%,生產(chǎn)批號(hào):140716),四川省維克奇生物技術(shù)有限責(zé)任公司。
選擇梅州市、從化、惠州市3個(gè)不一樣居群的天然的雞血藤手鐲,提取同一主莖、同一條藤莖的不一樣粗細(xì)位置(各自具備1~9個(gè)環(huán)氧樹脂環(huán)的藤莖),趁鮮切成片干躁,破碎,過40目篩,置密封袋中儲(chǔ)存預(yù)留,見表1。本試驗(yàn)常用原材料經(jīng)廣州市中國(guó)醫(yī)藥大學(xué)劉軍警民專家教授評(píng)定為豆類植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn.的藤莖。
依照《中國(guó)藥典:一部》(2015年版)附則XA測(cè)定方法。
參考劉軍警民等[9]方式測(cè)量。
流動(dòng)性相A為0.1%硫酸銨,流動(dòng)性相B為乙腈,梯度方向過柱(0~18 min,10%B;18~35 min,12%B;35~40 min,100%B;40~50 min,10%B);流動(dòng)速度:1.0 m L·min-1;柱溫:25℃;檢驗(yàn)光波長(zhǎng):290 nm(原兒茶酸)、280 nm(兒茶酸、表兒茶素);進(jìn)樣量:20μL。標(biāo)準(zhǔn)品及供試品水溶液色譜見圖1。
取原兒茶酸、兒茶酸和表兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品適當(dāng),高精密稱取,用50%工業(yè)甲醇配置成濃度值分別為0.439、0.472、0.415 mg·m L-1的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。各自高精密汲取100、200、200μL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液至2 m L量瓶中,加50%工業(yè)甲醇至標(biāo)尺,混勻,做成混和標(biāo)準(zhǔn)品水溶液,預(yù)留。
取雞血藤手鐲粉末狀1.0 g,高精密稱取,加工業(yè)甲醇60 m L,靜放30 min后超聲波50 min,濾過,水浴蒸干滲瀝液,沉渣用20 m L純凈水融解,轉(zhuǎn)置分液漏斗中;各自加乙酸丁酯20 m L,提純3次,合拼乙酸丁酯液,緩解壓力回收利用至干;用少量50%工業(yè)甲醇融解,滴定劑至10 m L量瓶,混勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。