取0.1 mL二茂鐵標(biāo)液和1 mL不一樣濃度值(3.15~44.15 mmol/L)的雙氧水異丙苯水溶液于差異的試管嬰兒中,添加用等保滴定劑至5 mL,添加0.1 mL苯甲酸后用等保滴定劑至5 mL。在60℃的恒溫水浴槽標(biāo)準(zhǔn)下加溫40 min,完畢后馬上用流動性冷卻水至室內(nèi)溫度,應(yīng)用等保校正基準(zhǔn)線在310 nm處檢驗(yàn)OD值值,根據(jù)二茂鐵與雙氧水異丙苯在不一樣摩爾比時的OD值明確二者反映的飽和狀態(tài)摩爾比。
試管嬰兒中添加1 mL二茂鐵標(biāo)液后,添加1 mL濃度值為15.77 mmol/L的雙氧水異丙苯水溶液,隨后各自添加0.1 mL有機(jī)物(苯甲酸,甲酸)和強(qiáng)氧化劑(鹽酸),等保滴定劑至5 mL。60℃的水浴鍋中反映40 min,反映進(jìn)行后在200~600 nm下開展全光波長掃描儀。
挑選 30,40,50,60,70℃5組不一樣的溫度。每一個試品中分別添加1 mL二茂鐵標(biāo)液和1 mL濃度值為15.77 mmol/L的雙氧水異丙苯水溶液,添加0.1 mL苯甲酸后用等保滴定劑至5 mL,在不一樣的反映溫度下加溫40 min,反映后制冷至室內(nèi)溫度在310 nm處開展檢驗(yàn)。設(shè)定10,20,30,40,50 min反應(yīng)速度,一樣的反映標(biāo)準(zhǔn)下到310 nm處檢驗(yàn)OD值轉(zhuǎn)變。
取0.1,0.2,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,1.0 mL濃度值為15.77 mmol/L的雙氧水異丙苯水溶液于試管嬰兒中,添加1 mL二茂鐵標(biāo)液和0.1 mL苯甲酸,等保滴定劑至5 mL,在最好檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)下為雙氧水異丙苯的濃度值(x)為橫坐標(biāo)軸,OD值值(y)為縱軸制作標(biāo)曲。按式(2)測算植物油脂丙二醛。
式中:
PV——丙二醛,mmol/kg;
Y——試品的OD值;
B——空缺的OD值;
A——標(biāo)曲的指數(shù);
M——抽樣量,g;
參考參考文獻(xiàn)的辦法明確二茂鐵法的方法檢出限。在玻璃試管種各自添加0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1.0 mL的1.58 mmol/L的雙氧水異丙苯水溶液,再添加1 mL二茂鐵標(biāo)液和0.1 mL的苯甲酸,用等保滴定劑至5 mL(等同于試品中雙氧水異丙苯濃度值為0.00,0.03,0.06,0.10,0.13,0.16,0.19,0.22,0.252,0.28,0.32 mmol/L)。在恒溫水浴鍋中60℃加溫40 min,加溫完成后馬上用流動性冷卻水至室內(nèi)溫度,在310 nm處檢驗(yàn)其OD值。獲得方法檢出限的預(yù)測值后依照加標(biāo)濃度值為可能方法檢出限的1~5倍范疇明確雙氧水異丙苯加上量,在整潔的試管嬰兒中添加適合的雙氧水異丙苯水溶液(15.77 mmol/L),再添加1 mL二茂鐵標(biāo)液和0.1 mL的苯甲酸,用等保滴定劑至5 mL,在60℃下加溫40 min,加溫完成后馬上用流動性冷卻水至室內(nèi)溫度,在310 nm處檢驗(yàn)OD值值,共檢驗(yàn)7組平行面。依據(jù)式(3)求取方法檢出限,以方法檢出限的3.3倍為定量限。
式中:
LD——方法檢出限,mmol/L;
s——加標(biāo)試品檢測最后的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差;
t——可玩性為n-1時的Student's值,可查值表獲得,當(dāng)n=7時,在99%可信區(qū)間(α=0.01)下,t=3.14;
n——加標(biāo)試品總數(shù),一般取7。
在試管嬰兒中分別添加1 mL空缺油樣、低加標(biāo)油樣(3.15 mmol/L雙氧水異丙苯)、里加標(biāo)油樣(7.89 mmol/L雙氧水異丙苯)、高加標(biāo)油樣(12.62 mmol/L雙氧水異丙苯),再添加1 mL二茂鐵標(biāo)液和0.1 mL的苯甲酸,用等保滴定劑至5 mL,在60℃情況下加溫40 min,隨后在310 nm下檢驗(yàn)試品的OD值值。
按GB 5009.227—2016實(shí)行。