以紅花籽粕的水解度和復(fù)原力為實驗指標值,以超聲波時間、超聲波溫度、pH、酶使用量為實驗要素,期貨操作要素實驗,剖析各要素對紅花籽粕的水解度和復(fù)原力的危害。
在單要素實驗的根基上,對危害胰蛋白酶的水解度和復(fù)原力的首要要素超聲波時間、超聲波溫度、pH、酶使用量等開展L9(34)正交實驗,以明確胰蛋白酶酶解的最合適的技術(shù)標準。正交試驗要素水準見表1。
在光波長275nm下,測得OD值A(chǔ),結(jié)果如表2。
以L-色氨酸濃度值為橫坐標軸,吸光度數(shù)值縱軸得L-色氨酸規(guī)范趨勢圖1。
由圖1得到L-色氨酸規(guī)范曲線方程為:Y=0.0175X-0.0024,R²=0.9998,R²>0.997說明L-色氨酸在0-60μg/mL濃度值范疇內(nèi)線性相關(guān)優(yōu)良。
剖析三種胰蛋白酶沒經(jīng)超聲波解決和超聲波處置的酶魅力的轉(zhuǎn)變,依據(jù)(1)計算公式出酶魅力。
試驗結(jié)果顯示,蛋白酶k的活力增強了2.96倍,枯草枯草芽孢菌中性化胰蛋白酶提升了1.91倍,蛋白酶的活力增強了1.17倍,蛋白酶k的活力提升更快,實驗效果證實在55℃標準下要超音波解決10min推動了酶的溶解,提升 了胰蛋白酶的魅力,由數(shù)據(jù)信息看得出蛋白酶k提高更快,因此 選擇蛋白酶k開展加工工藝科學研究。
在酶使用量為2.9%、pH7.0、超聲波溫度為55℃的標準下,各自測超聲波時間為5min、10min、15min、20min、25min的情形下水解反應(yīng)1h,其水解度和復(fù)原力結(jié)果如圖2、圖3所顯示。
由圖2,圖3得知,超聲波時間的更改水解度和復(fù)原力都遭受了危害,水解度在超聲波時間為10min的情況下較大,以后的由于時間提高,復(fù)原力降低顯著,可能是酶降解,水解度降低;復(fù)原力在超聲波時間為15min的情況下較大,其復(fù)原力最強。綜合性考慮到,覺得超聲波時間10min更為適合。
在酶使用量為2.9%、pH7.0、超聲波時間為10min的標準下,各自測超聲波溫度為35℃、45℃、55℃、65℃、75℃的情形下水解反應(yīng)1h,其水解度和復(fù)原力結(jié)果如圖4、圖5所顯示。
由圖4得知,起先伴隨著超聲波溫度的提升,紅花籽粕的水解度擴大,在超聲波溫度是65℃時,水解度較大,隨后逐漸發(fā)生下降趨勢,表明在65℃以內(nèi)時可能是因為熱轉(zhuǎn)性導(dǎo)致的水解度較大;由圖5得知,起先伴隨著超聲波溫度的提升,紅花籽粕的復(fù)原力擴大,在超聲波溫度是55℃時,復(fù)原力較大,隨后逐漸發(fā)生下降趨勢,可是降低不顯著。綜合性考慮到水解度、復(fù)原力等要素,覺得最好超聲波溫度為65℃。