（4）黑豆活性多肽抗氧化與酶解時間的關(guān)聯(lián)

根據(jù)單要素試驗的結(jié)果，能夠挑選出各要素的三個水準(zhǔn)。因此在這個基礎(chǔ)以上，運用數(shù)據(jù)分析手機軟件創(chuàng)建4要素3水準(zhǔn)的Box—Behnken實體模型，開展回復(fù)面可靠性設(shè)計試驗標(biāo)準(zhǔn)開展試驗，更改酶解時間結(jié)果見4所顯示。

由圖4得知，當(dāng)反應(yīng)速度不超過2h，DPPH清除率與氣溫正相關(guān)，當(dāng)響應(yīng)時間超出2h，DPPH清除率與溫度反比，在2h時DPPH清除率做到最高值。當(dāng)水解反應(yīng)的時間段過短時間，黑豆蛋白質(zhì)生物大分子沒有水解反應(yīng)成具備小分子水生物活性的生物活性肽，因此水解反應(yīng)物DPPH的清除率較小。而水解反應(yīng)的時間段太長則會造成 生物大分子蛋白過多水解反應(yīng)成碳水化合物或是是不再具有生物活性短肽鏈的化學(xué)物質(zhì)。

2、應(yīng)面試驗結(jié)果

（1）線性回歸方程實體模型方差分析

單要素試驗探討了各種要素對黑豆活性多肽抗氧化的危害，為了更好地全方位調(diào)查影響因素，仍需明確酶解時間、酶解溫度、pH、酶濃度值對黑豆抗氧化性肽的耐熱性的危害。故選用再次用回應(yīng)法對黑豆抗氧化性肽獲取的技術(shù)完成提升。以酶解溫度(X₁)、酶解pH(X₂)、酶濃度值(X₃)、酶解時間(X₄)為變量，DPPH清除率的響應(yīng)面試驗結(jié)果見表2。溫度(X₁)、酶解pH(X₂)與酶濃度值(X₃)、酶解時間(X₄)為變量，DPPH清除率為回復(fù)值的響應(yīng)面試驗結(jié)果見表2。

依據(jù)響應(yīng)面實驗方案設(shè)計以及試驗結(jié)果，必須創(chuàng)建線性回歸方程實體模型，用以分辨各要素兩者之間的配對t檢驗是不是明顯，為用以分析和剖析黑豆活性多肽抗氧化的轉(zhuǎn)變，因此還需分辨其偏差的尺寸。即試驗擬合程度與在最好情況下抗氧化的一致水平。黑豆活性多肽抗氧化的線性回歸方程實體模型的方差分析如表3所顯示。

由表3得知，該回歸分析P＜O.000l，方程式實體模型做到極明顯，失擬項P=0.1471＞0.05，不明顯，表明實體模型創(chuàng)建恰當(dāng)。該回歸分析的總決策系R²=0.9568，表明方程式擬合程度不錯，試驗偏差小，故該線性回歸方程實體模型創(chuàng)立，可以用此實體模型對黑豆活性多肽的抗氧化開展解析及預(yù)測分析。從而實體模型獲得的此線性回歸方程為：Y=45.24—6.00X₁ 1.47X₂—1.35X₃ 0.36X₄ 1.81X₁X₂—2.60X₁X₃ 1.06X₁X₄ 0.20X₂X₃一0.17X₂X₄ 0.14X₃X₄—4.98X₁²—0.97X₂²—0.70X₃²—0.90X₄²。

（2）回應(yīng)斜面結(jié)果剖析

響應(yīng)面圖可反饋出不同要素對黑豆活性多肽抗氧化的危害，依據(jù)斜面圖的張口房屋朝向及斜面樣子分辨在試驗范疇內(nèi)是不是存有最值、各要素兩者之間的相互影響是不是明顯。

融合表3、圖5及圖6可看得出，危害DPPH氧自由基清除率的順序為：溫度(X₁)＞pH(X₂)＞酶濃度值(X₃)>酶解時間(X₄)，X₁、X₂、X₃、X_1³項做到互極明顯水準(zhǔn)(P＜0.01)，X_1²、項做到明顯水準(zhǔn)(P＜0.05)。響應(yīng)面的最佳標(biāo)準(zhǔn)：溫度43.47℃，pH為9.19，酶濃度值為6.51％，水解反應(yīng)時間為2.22h，DPPH氧自由基清除率47.14％。

3、認(rèn)證試驗

為了更好地認(rèn)證響應(yīng)面結(jié)果的穩(wěn)定性，依據(jù)響應(yīng)面提升出的最好加工工藝開展三次認(rèn)證試驗。具體取得的黑豆活性多肽DPPH清除率的平均數(shù)是47.03％，與剖析值相距0.23％。與響應(yīng)面估計值比較符合，表明響應(yīng)面得到的最佳標(biāo)準(zhǔn)具備可行性分析。

三、結(jié)果

根據(jù)響應(yīng)面提升試驗剖析出危害黑豆抗氧化性肽的制取要素，這四個要素對黑豆抗氧化性肽獲取的危害水平次序為：酶解溫度＞pH＞酶濃度值＞酶解時間。本試驗得到的黑豆抗氧化性加工工藝標(biāo)準(zhǔn)為：酶解溫度43.47℃、pH9.19、酶濃度值6.51％、酶解時間2.22h，在這里加工工藝標(biāo)準(zhǔn)下取得的黑豆抗氧化性肽對DPPH清除率的平均數(shù)為47.03％，與手機軟件得出的標(biāo)準(zhǔn)偏差相距0.23％。本研究對黑豆抗氧化性肽獲取標(biāo)準(zhǔn)完成了提升，且黑豆活性多肽的抗氧化為黑豆活性多肽在抗氧化食品、保健產(chǎn)品等領(lǐng)域的開發(fā)設(shè)計及藥學(xué)科學(xué)研究帶來了更加高效的根據(jù)。