目地選用HPLC測定方法不一樣原產地和不一樣生長發(fā)育年代北蒼術[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中赤芍素的成分。方式搜集不一樣來源的北蒼術試品,以工業(yè)甲醇為有機溶劑,選用超聲波獲取法獲取,選用HPLC測定方法赤芍素的成分,采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μL)離子交換柱,流動性相為工業(yè)甲醇-水(79∶21),檢驗光波長為340nm,流動速度1mL/min,柱溫25℃,進樣量20μL。結果赤芍素的線形范疇為0.1875~0.6000mg/mL,方式精度、可重復性、可靠性優(yōu)良;加樣利用率為95.4%。不一樣原產地北蒼術中赤芍素的成分為0.3232%~0.5959%,阿榮旗產北蒼術中藥飲片中赤芍素成分最大。3年生、4年生、5年生蒼術中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%。結果本方式簡單、迅速、精確,適用北蒼術中赤芍素的含水量測量。
2015年版《中國藥典》要求,赤芍的主要來源有2種,分別是茅蒼術(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北蒼術(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅蒼術關鍵產自江蘇省、湖北省、河南省等??;北蒼術關鍵產于內蒙古、山西省、黑龍江省、吉林省等省。研究表明赤芍的關鍵成分為高壓聚乙烯炔和倍半萜類物質,具備防癌、抗菌、抗病毒治療等藥用價值,臨床醫(yī)學上常見于病毒性感染疾病的治療。北蒼術的原綠色植物遍布范圍普遍,全國各地環(huán)境要素各有不同,危害赤芍中草藥的品質。本科學研究創(chuàng)建了HPLC法,測量不一樣來源于北蒼術中赤芍素的成分,現(xiàn)報導如下所示。
1儀器設備與試藥
1.1儀器設備
Waters2695型液相色譜(沃特世高新科技有限責任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司),DFT200C型快速多用途破碎機(永康市敏業(yè)物資貿易有限責任公司),CPX3800H-C型超聲波清洗機(日本BRAN-SONIC企業(yè)),DHG-9240A型控溫鼓風干燥箱(常州市國旺儀器設備生產制造有限責任公司),PALL水提純系統(tǒng)軟件(英國PallCorporation企業(yè)),ML203T/02型十萬級電子分析天平(法國梅特勒-托利多儀器設備有限責任公司),MDF-492型超低溫冰箱(日本三洋公司)。
1.2實驗試劑
工業(yè)甲醇(色譜純,德國默克企業(yè),生產批號:603-001-00-x),95%酒精(天津市福晨化學藥品廠,生產批號:20171110),乙醚(沸程60~90℃,天津市福晨化學藥品廠,生產批號:20171201),赤芍素標準物質(我國食品藥品安全檢驗研究所,生產批號:111924-201806)。
1.3中藥材
市面上中藥飲片的原產地各自來源于內蒙古阿榮旗、赤峰市、莫力達瓦達斡爾族自治旗(通稱“莫旗”)、扎蘭屯;3年生、4年生、5年生種植北蒼術地下莖均采自于蒙古族自治州莫力達瓦旗多熱博熱其勒村(通稱“多熱”),先后標識為1~7號。經齊齊哈爾市醫(yī)科院藥學院王曉麗副教授職稱評定為北蒼術[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的地下莖。
2方式與結果
2.1水溶液制取方式
2.1.1標準品水溶液
稱量赤芍素標準物質適當,工業(yè)甲醇融解,超聲波10min,制取20μg/mL的水溶液,經0.45μm的微孔濾膜濾過,預留。
2.1.2供試品水溶液
取“1.3”項下不一樣來源的北蒼術中藥飲片,破碎后過三號篩,各自稱量0.2g,放置具塞錐形瓶中,添加工業(yè)甲醇50mL,用封口膜密封性后,稱取凈重,超聲波獲?。ㄝ敵龉β?50W,頻率40KHz)1h,制冷至常溫后,稱取凈重,用工業(yè)甲醇補充缺少的凈重,用0.45μm過慮活性炭過濾,取續(xù)滲瀝液,預留。
2.2色譜儀標準
DiamonsilC18離子交換柱(4.6mm×250mm,5μL),流動性相工業(yè)甲醇-水(79∶21)等度過柱,流動速度1.0mL/min,檢驗光波長340nm,進樣量20μL。
2.3方法學調查
2.3.1線性相關調查
高精密稱量標準品60mg,工業(yè)甲醇滴定劑至10mL,攪拌,移取1mL至10mL容量瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,標識為1號。從2號中汲取5mL水溶液,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,標識為2號。依此類推,得3、4、5、六號水溶液。按“2.1”項色譜儀標準下開展測量。以峰總面積為縱軸(Y),標準品濃度值為橫坐標軸(X)開展回歸分析,得線性回歸方程為Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998),標準品濃度值在0.01875~0.6000mg/mL范疇內線性相關優(yōu)良。
2.3.2精度實驗
汲取“2.1.2”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項色譜儀標準,持續(xù)氣相6次,測量峰總面積,經測算RSD為0.49%,說明儀器設備精度優(yōu)良。
2.3.3可重復性實驗
汲取“2.1.1”項下對比水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標準,持續(xù)氣相6次,測量赤芍素峰總面積,經測算RSD為1.79%,說明方式可重復性優(yōu)良。
2.3.4可靠性實驗
汲取“2.1.1”項下供試品水溶液20μL,按“2.2”項下色譜儀標準,各自在0、2、4、6、8、10h時氣相,測量赤芍素峰總面積RSD為1.74%,說明供試品水溶液在10h內可靠性優(yōu)良。
2.3.5加樣利用率實驗
稱量11號粉末狀0.1000g,共6份,各自添加“2.1.1”項下對比水溶液5mL,放置50mL錐形瓶中,用工業(yè)甲醇滴定劑至標尺,超聲波獲取1h后過0.45μm微孔濾膜,取續(xù)滲瀝液,按“2.2”項下色譜儀標準測量,測算利用率為95.4%,見表1。
各自稱量1~花了7天時間赤芍試品0.2g,每一份中藥材制取3份平行面樣,按“2.1.2”項下方式制取供試品水溶液,按“22..22”項色譜儀標準測量,結果不一樣產區(qū)的赤芍中赤芍素的成分為0.3200%~0.5599%,阿榮旗中藥飲片中赤芍素成分最大。三年生、四年生、5年生蒼術中赤芍素的成分各自為:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%,見表2。
3探討
成分測量數(shù)據(jù)顯示,四年生人力種植北蒼術的赤芍素比三年生和5年生的成分高,以指標值成份的成分為根據(jù),本試驗結果顯示北蒼術的最好種植時間為四年,與市面上中藥飲片對比,內蒙古自治區(qū)莫旗的人力仿天然的栽種赤芍中赤芍素的成分符合規(guī)定。赤芍中揮發(fā)物化學成分是關鍵活力成份,為獨特的次生新陳代謝物質,其成分受基因遺傳、個體發(fā)育和環(huán)境破壞的危害。內蒙古為暖溫帶大陸性氣候,阿榮旗、莫旗、扎蘭屯及多熱位于內蒙古自治區(qū)東部地區(qū),坐落于大興安嶺地區(qū)東麓中區(qū),氣侯展現(xiàn)出春溫、夏升、秋降、三九嚴寒的特性,強烈的溫度差有益于地區(qū)內北蒼術身體化學物質累積。本方式簡單、迅速、精確,適用北蒼術中赤芍素的含水量測量。