（4）液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)

離子交換柱：以十八烷基氯硅烷引線鍵合硅橡膠為填充料，DikmaDiamons訂C18（4.6mm×150mm，5μm）；流動(dòng)性相：工業(yè)甲醇；流動(dòng)速度：1.0mL/min；檢驗(yàn)光波長(zhǎng)：284nm柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。

（5）標(biāo)液工作中曲線圖

高精密稱量105℃干躁至恒重的花青素標(biāo)準(zhǔn)品28.63mg和維生素E冰醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品12.42mg于同一個(gè)10mL容量瓶中，加適當(dāng)工業(yè)甲醇融解并稀釋液至標(biāo)尺，混勻，獲得混和標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。該儲(chǔ)備液遮光儲(chǔ)存?；旌鸵?guī)范儲(chǔ)備液適當(dāng)，逐步稀釋液，配置成花青素濃度值為0.2806、0.8417、1.4028、1.9640、2.8057mg/mL，維生素E冰醋酸酯濃度值為0.1236、0.3707、0.6179、0.8651、1.2358mg/mL的混和標(biāo)液，以十八烷基氯硅烷引線鍵合硅橡膠為填充料，DikmaDiamons訂C18（4.6mm×150mm，5μm）；流動(dòng)性相：工業(yè)甲醇；流動(dòng)速度：1.0mL/min；檢驗(yàn)光波長(zhǎng)：284nm柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。的色譜儀標(biāo)準(zhǔn)氣相剖析，紀(jì)錄色譜。以峰總面積積分?jǐn)?shù)值縱軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度值為橫坐標(biāo)軸，開(kāi)展回歸分析，花青素在0.2806～2.8057mg/mL濃度值范疇內(nèi)，維生素E冰醋酸酯在0.1236～1.2358mg/L濃度值范疇內(nèi)呈優(yōu)良的線性相關(guān)。二者的線形相關(guān)系數(shù)r均為0.999之上，兩成分線形線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)r如表1所顯示。

二、結(jié)果與剖析

1、紫外線較大消化吸收光波長(zhǎng)的挑選

將維生素E冰醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品水溶液引入液相色譜（配置DAD紫外線探測(cè)器），打開(kāi)光譜儀收集，在主成份峰部位觀查較大消化吸收光波長(zhǎng)（見(jiàn)圖2）。結(jié)果顯示：維生素E冰醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的最高消化吸收光波長(zhǎng)與檢驗(yàn)光波長(zhǎng)284nm一致。

2、試品解決時(shí)超聲波時(shí)間的挑選

本實(shí)驗(yàn)與此同時(shí)調(diào)查5個(gè)不一樣超聲波獲取時(shí)間，各自為5min，10min，20min，30min，40min，對(duì)花青素及維生素E加標(biāo)試品的獲取實(shí)際效果，利用率隨時(shí)長(zhǎng)轉(zhuǎn)變關(guān)聯(lián)如圖所示3。

數(shù)據(jù)顯示，在超聲波獲取5min狀況下，試品中花青素和維生素E兩成分獲取不徹底，利用率較低；當(dāng)超聲波時(shí)間增加至10min時(shí)，兩成分利用率有所增加，當(dāng)超聲波獲取時(shí)間增加至20min時(shí)，萃取液中兩成分利用率均實(shí)現(xiàn)最大；超聲波獲取30min、40min后兩成分利用率基本上平穩(wěn)且略微降低，因而試驗(yàn)選用超聲波獲取20min的辦法可合理獲取葡萄籽維生素E膠囊中的花青素和維生素E。

3、可靠性調(diào)查

稱量葡萄籽維生素E膠囊（生產(chǎn)批號(hào)20190115）內(nèi)容物約100mg，高精密稱取。高精密稱量葡萄籽維生素E膠囊（生產(chǎn)批號(hào)20190115）內(nèi)容物0.1g于25mL量杯中，添加10mL工業(yè)甲醇，放置70℃水浴中加溫，振搖使內(nèi)容物分散化，馬上遷移至25mL容量瓶中，再用10mL工業(yè)甲醇分三次清洗量杯，清洗液轉(zhuǎn)到容量瓶，超聲波獲取20min，取下，制冷至室內(nèi)溫度，用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)慮，做為供試品水溶液。各自于制取后0，2，4，6，8，10，12h氣相測(cè)量，紀(jì)錄色譜，測(cè)算得12h內(nèi)花青素色譜儀峰總面積RSD為0.3％，維生素E冰醋酸酯色譜儀峰總面積RSD為0.1％，表明供試品水溶液在12h內(nèi)平穩(wěn)（見(jiàn)表2）。

4、可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

稱量葡萄籽維生素E膠囊（生產(chǎn)批號(hào)20190115）內(nèi)容物6份，每一份約100mg，高精密稱取。高精密稱量葡萄籽維生素E膠囊（生產(chǎn)批號(hào)20190115）內(nèi)容物0.1g于25mL量杯中，添加10mL工業(yè)甲醇，放置70℃水浴中加溫，振搖使內(nèi)容物分散化，馬上遷移至25mL容量瓶中，再用10mL工業(yè)甲醇分三次清洗量杯，清洗液轉(zhuǎn)到容量瓶，超聲波獲取20min，取下，制冷至室內(nèi)溫度，用工業(yè)甲醇滴定劑至標(biāo)尺，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)慮，做為供試品水溶液。測(cè)算得6份試品花青素與維生素E（以α-維他命d計(jì)）成分均值各自為41.44g/1009（RSD為0.9％）、16.80g/100g（RSD為1.1％），說(shuō)明此方法可重復(fù)性優(yōu)良（見(jiàn)表3）。