草魚是在我國具體的淡水魚類之一，被普遍作為很多魚種產(chǎn)品的原材料。殊不知，魚種帶有充足的蛋白，易腐壞霉變，因而科學(xué)研究草魚冷藏方式有著關(guān)鍵的實(shí)際意義。傳統(tǒng)式的冷藏方式有冷藏、超低溫、輻照度、高壓、有機(jī)化學(xué)及微生物冷藏法。在其中可食膜因具備低碳環(huán)保、無毒性沒害，可以提升 食物的產(chǎn)品質(zhì)量和增加食品保質(zhì)期等優(yōu)勢(shì)，促使大家對(duì)其愈來愈有興趣。近些年科學(xué)研究較多的可食膜原材料有含糖量、蛋白、脂類或一些中性化生物大分子原材料的組成物，且大家更加偏向于從魚身自身得到冷藏原材料。近幾年來，很多專家對(duì)魚皮膜愈來愈有興趣，Gimenez等證實(shí)，根據(jù)在大魷魚果膠中添加一種堿性蛋白酶開展水解反應(yīng)后，制取獲得的大魷魚明膠紙的抗氧化明顯增強(qiáng)。也有專家學(xué)者在冷藏儲(chǔ)存削皮三文魚時(shí)，用帶有2％殼聚糖鍍層對(duì)其開展冷藏，實(shí)際效果要顯著好于三文魚或比目魚蛋白質(zhì)粉鍍層。而魚鱗片做為草魚生產(chǎn)制造生產(chǎn)過程的邊角料，帶有充足的膠原，其酶解物質(zhì)具備抑止細(xì)菌生長發(fā)育和液汁外流的功效，根據(jù)魚鱗片果膠制取可食膜遮蓋魚身，既能夠變廢為寶，又可以增加魚種的保存期，維持魚種原有的口味。

一直以來，大家較多應(yīng)用生成抗氧劑開展食物的冷藏，但傳統(tǒng)式生成的還原劑如叔丁基對(duì)甲基小茴香醚(BHA)、二丁基甲基二甲苯(BHT)等自身很有可能具備潛在的毒副作用，對(duì)身體造成不良影響。而近些年，具備抗氧化性活力的自然多酚類物質(zhì)馬郁蘭提取液，愈來愈多的被使用到食物中，馬郁蘭提取液的抗氧化和抗菌性已被普遍確認(rèn)?？墒?，針對(duì)馬郁蘭提取液運(yùn)用于魚鱗片膜是不是會(huì)產(chǎn)生機(jī)械設(shè)備隔絕，并根據(jù)花青素一蛋白的相互影響而降低活性物質(zhì)的釋放出來，有關(guān)科學(xué)研究仍較少。植酸作為一種金屬材料抗氧化劑，在色調(diào)維護(hù)和抗氧化性層面充分發(fā)揮著關(guān)鍵功效，在魚鱗片膜中添加植酸，也想要能夠提升 魚鱗片膜的抗氧化和感觀特點(diǎn)。

目前為止，大家對(duì)魚鱗片可食膜的分析還較少，對(duì)添加馬郁蘭提取液和植酸是不是能明顯提升 魚鱗片可食膜的抗氧化還不太清晰。根據(jù)以上緣故，本試驗(yàn)致力于討論魚鱗片果膠、馬郁蘭提取液及植酸對(duì)增加草魚貨架期的功效，以求為工業(yè)生產(chǎn)魚鱗片果膠可食膜給予理論基礎(chǔ)。

一、原材料與方式

1、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)試劑原材料

草魚、馬郁蘭葉：當(dāng)?shù)劁N售市場(chǎng)選購；胃蛋白酶：北京市德國拜耳迪生物科技有限責(zé)任公司；植酸：北京醫(yī)藥臨床實(shí)驗(yàn)核心；沒食子酸、NaOH、酒石酸鉀鈉、KCL、硫代硫酸鈉、工業(yè)乙醇、考馬斯亮藍(lán)、吡啶、正丁醇、丙二醛、1，1，3，3-四乙氧基丙烷氣、凡士林、巰基乙醇、溴酚藍(lán)、正丁酸、SDS、平板電腦記數(shù)瓊脂粉：國藥控股化學(xué)藥品有限責(zé)任公司給予；硫酸銨、冰乙酸：西隴科學(xué)股權(quán)有限責(zé)任公司給予；三磷酸腺苷(ATP)、β-硫代巴比妥酸(TBA)：天津北辰華康試劑廠；牛血清蛋白：杭州市吳天生物科技服務(wù)項(xiàng)目有限責(zé)任公司給予。

2、要實(shí)驗(yàn)儀器

紫外線光度計(jì)(UV-2600)：尤尼柯(上海市)儀器設(shè)備有限責(zé)任公司，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(SHB-3)：上海市申生高新科技有限責(zé)任公司；離心脫水機(jī)(SC-3612)：安徽省中科中佳儀器設(shè)備有限責(zé)任公司；組織搗碎機(jī)(PT-2100)：法國Kinematica企業(yè)；渦流切換閥(S025)：法國IKA企業(yè)；pH計(jì)(UB-7)、PL602-L電子分析天平：法國Sartorius企業(yè)；半少量蒸餾裝置(KDY-9820)：北京市瑞邦興業(yè)科技有限責(zé)任公司；電泳儀(MiniProtean11unit)：英國BIO-RAD企業(yè)；液相色譜(LC-10AT)配紫外線探測(cè)器：Et本安捷倫儀器企業(yè)；離子交換柱：VP-CDSC18(4.6mm×250mm×5μm)。

3、方式

（1）魚鱗片果膠的制取

應(yīng)用冷藏的新鮮草魚魚鱗片，在-18℃下儲(chǔ)存不超過兩個(gè)月，將清洗并干躁的魚鱗片與雙蒸水(1:10，w／v)混和，用1mol／LHCL調(diào)整pH至2.0，添加5％的胃蛋白酶(1:3000)后，放置60℃恒溫水浴鍋中反映6h，接著將水溶液放置開水浴中10min滅酶。用1mol／LNaOH將水溶液pH調(diào)至至7.0，用醫(yī)用紗布過慮果膠水溶液并攪拌，將勻漿于3600r／min下離心式3min，將所得的上清液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器于60℃轉(zhuǎn)動(dòng)揮發(fā)30min，將濃縮果膠水溶液(蛋白質(zhì)成分：28.56mg／mL)于4℃下儲(chǔ)藏，蛋白質(zhì)成分選用雙縮脲測(cè)定方法心，結(jié)果為三次測(cè)量的均值。

（2）馬郁蘭提取液的制取

關(guān)鍵選用Gomez等的辦法制取馬郁蘭水提物，并對(duì)辦法開展小量改善。精確稱量10g馬郁蘭葉，碾磨碎后，在65℃下獲取10min，將提取液放置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中于60℃下水蒸氣蒸餾30min，其花青素成分達(dá)2448.56μg／mL?；ㄇ嗨爻煞诌x用F01in-酚測(cè)定方法，以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用紫外線光度計(jì)于750nm下測(cè)量，結(jié)果為三次測(cè)量均值，總酚濃度值(μg／mL)以沒食子酸計(jì)。

（3）鍍層水溶液的配制及解決

在草魚試品表層各自涂有四種含有12mg／mL凡士林的水溶液，全部膜水溶液的成份按以下占比開展配置。

F0組：對(duì)照實(shí)驗(yàn)，草魚表層不涂層；Fl組：草魚表層涂有魚鱗片果膠液(25mg／mL)；F2組：

草魚表層涂有含200μg／mL馬郁蘭提取液的魚鱗片果膠液(25mg／mL)；F3組：草魚表層涂有含200μg／mL植酸的魚鱗片果膠液(25mg／mL)；F4組：草魚表層涂有含20099／mL馬郁蘭提取液及200μg／mL植酸的魚鱗片果膠液(25mg／mL)。

試品為在本地銷售市場(chǎng)選購的新鮮去內(nèi)臟器官草魚，并清理整潔，F(xiàn)1～F4組試品各自泡浸在對(duì)應(yīng)的4℃水溶液中1.5min，并與對(duì)照實(shí)驗(yàn)F0一起晾曬。接著將5組草魚試品F0～F四分別放置聚丙稀拖盤中，并且用高壓聚乙烯保鮮袋嚴(yán)實(shí)遮蓋，包裝好后于4℃電冰箱內(nèi)儲(chǔ)存。每2天隨機(jī)抽取草魚試品開展微生物菌種、有機(jī)化學(xué)和感觀剖析，每一個(gè)試品平行測(cè)定三次。

（4）SDS-聚合硫酸鐵凝膠電泳測(cè)量

根據(jù)SDS-PAGE譜圖剖析馬郁蘭提取液、植酸與黃原膠的相互影響。將果膠水溶液與雙蒸水混和，隨后與上樣緩沖溶液(100mmol／LTris-HCL、1.6％SDS、8％凡士林、8mmol／L巰基乙醇和0.02％溴酚藍(lán))按1:1的比率混和，蛋白終濃度值1mg／mL。試品于100℃下熱轉(zhuǎn)性4min，并在添加4％濃縮膠和10％分離出來膠的電泳槽中開展剖析，操縱電流量在25mA，先后在各加樣孔加樣9μL。待溴酚藍(lán)顯色劑抵達(dá)疑膠底端邊沿時(shí)可終止電泳原理，取下并砸開玻璃，取下疑膠，上色、褪色，直至蛋白質(zhì)區(qū)帶清楚，開展圖象掃描儀，直至尋找光密度值有差別的雜帶。

（5）試品儲(chǔ)藏實(shí)驗(yàn)

①抗菌實(shí)驗(yàn)為了更好地調(diào)查膜的抗菌特性，將5g魚類在滅菌室內(nèi)環(huán)境中添加45mL無菌檢測(cè)鹽水并勻漿1min，勻漿后的試品用9mL無菌檢測(cè)鹽水逐步稀釋液至適宜的濃度值，并且于36℃下塑造2天，用平板電腦計(jì)數(shù)法測(cè)量菌落總數(shù)。在數(shù)據(jù)分析以前，將病菌數(shù)轉(zhuǎn)換為log10菌落形成企業(yè)／克(CFU／g)，每一個(gè)試品重3次，測(cè)算均值。

②揮發(fā)物鹽基氮(TVB-N)成分的測(cè)量

TVB-N按半少量定氮法開展測(cè)量。每一個(gè)試品在貯藏期內(nèi)反復(fù)測(cè)量三次。精確稱量10.00g碾磨后的試品，并添加100mL雙蒸水，勻稱拌和并波動(dòng)30min，在離心脫水機(jī)5000r／min離心式10min，獲得上清液，過慮，滴定劑，選用半少量定氮法測(cè)出，每過2天測(cè)量一次。

③β-硫代巴比妥酸(TBA)值的測(cè)量

TBA值的測(cè)量選用Krik和Sawyer所運(yùn)用的方式 。